отзывы, краткий обзор серий и характеристики, цены

Как подогреть воду для приема ванны и душа, мытья посуды и умывания? Все эти задачи решают накопительные водонагреватели – приборы, обеспечивающие комфортные условия независимо от времени года, наличия отопительной системы и типа жилья. Бойлер способен заменить централизованное горячее водоснабжение в квартире во время сезонных ремонтов труб, стать его достойной альтернативой на даче или в частном доме. Чтобы приобрести качественный и безотказный прибор, следует ответственно подойти к выбору производителя, сравнить характеристики моделей, изучить отзывы пользователей. Не помешает также узнать, насколько доступны запчасти к бойлеру.

Оглавление:

1. Конструкция бойлера
2. Обзор серий
3. Отзывы и мнения потребителей
4. Критерии выбора
5. Цена популярных моделей

Конструктивные особенности

Большой популярностью у покупателей пользуются бойлеры от итальянской компании Thermex, освоившей их производство в конце сороковых годов прошлого века (в данной статье приведены характеристики Термекс).

1. Наружный корпус. Почти у всех моделей Термекс он выполнен из стали, за исключением бойлеров объемом 5, 10 и 15 литров, изготовленных из качественного пластика.

2. Внутренний резервуар. Его производят из специальной нержавейки или стали с антикоррозионным покрытием из эмали либо термически обработанного стеклофарфора.

3. Магниевый анод. Это устройство, предотвращающее коррозионное разрушение стенок резервуара и нагревательного элемента. Анод необходимо менять каждые 6 месяцев.

4. Термостат. Он предназначен для контроля температуры подогреваемой воды (режим задается с помощью терморегулятора) и периодического отключения нагревателя. Бойлеры Термекс снабжены термостатами с двойной системой защиты, предохраняющей ТЭН от перегрева.

5. Нагревательный элемент. Он представляет собой спираль из нихромовой проволоки, помещенную в медную трубку, обладающую высокой теплоотдачей. Подобное устройство обеспечивает быстрый нагрев воды.

6. Трубка с рассекателем. Ее назначение – подача холодной воды и ее равномерное распределение по резервуару, исключающее смешивание с горячей водой.

7. Теплоизоляция. Ей заполняют зазор между внутренним баком и корпусом. Качественный утеплитель CFC FREE позволяет дольше удерживать температуру воды и снижать расход электроэнергии.

На корпусе бойлера прикреплен съемный фланец. К нему изнутри крепятся ТЭН, термостат и магниевый анод – именно эти запчасти приходится снимать во время профилактики или ремонта. На некоторых моделях Термекс имеются сенсорные панели для установления нужной температуры, а также пульт дистанционного управления.

Линейки продукции

Сейчас линейка бойлеров Термекс представлена разнообразными агрегатами, отличающимися формой, габаритами, мощностью, способом управления.

1. FLAT TOUCH. Представители этой серии имеют форму параллелепипеда со сглаженными углами – это позволяет экономить пространство помещения. Есть модели для вертикального или горизонтального монтажа. Корпусы и резервуары изготовлены из полированной нержавейки, емкость бака – от 30 до 100 л. Выставлять режим и следить за ним помогает сенсорный LSD-дисплей.

2. ROUND PLUS. Круглые водонагреватели, баки и наружные элементы произведены из высокопрочной нержавеющей стали с антикоррозионной обработкой. Модели емкостью 30-100 л предназначены для горизонтального или вертикального подвешивания на стену, бойлеры на 200-300 л – для установки на полу.

3. FLAT PLUS. Плоские настенные водонагреватели Термекс с белым эмалированным корпусом и резервуаром из стали, устойчивой к коррозии. Емкость агрегатов – 30-100 л, есть варианты для горизонтального и вертикального монтажа. В комплект входит электронная панель и ЖК-дисплей.

4. ULTRA SLIM. Круглые приборы малого диаметра (27 мм) емкостью 30, 40 и 50 л. Все они вертикальные, их удобно размещать в нишах и шкафчиках.

5. CHAMPION. Классические круглые накопительные водонагреватели горизонтального, вертикального и напольного исполнения, емкость – от 30 до 300 литров. Особенность: покрытие из биостеклофарфора на внутренней поверхности резервуара.

6. CHAMPION SLIM. Отличается от предыдущей серии узкими размерами.

7. SPRINT. Вертикальные прямоугольные бойлеры со стеклофарфоровым покрытием и емкостью 30-100 л. Особенность моделей – система ускоренного нагрева воды Turbo Boiler.

8. HIT. Компактные накопительные водонагреватели на 10-30 литров с корпусом из упрочненного пластика. Фланец для подключения подачи воды размещается вверху или внизу.

9. ELITE. Корпуса и резервуары бойлеров изготовлены из нержавейки. Работу агрегата регулирует миникомпьютер, предусмотрен пульт дистанционного управления. Варианты исполнения – вертикальное и горизонтальное.

Отзывы о водонагревателях

«6 лет назад решил приобрести для дачи бойлер Термекс – и не прогадал. Нашей семье из 4-х человек вполне хватает 100-литровой емкости. После зимнего отключения первоначальный нагрев продолжается 2,5 часа, а потом просто поддерживается заданный режим. Даже при интенсивном потреблении практически не бывает перебоев с горячей водой. Водонагреватель работает тихо, а еще он очень экономен».

Валерий Брагин, Саратов.

«Делая ремонт в квартире, первым делом решил поставить бойлер. Изучив отзывы, выбрал модель Thermex IF 50-F (1,3/2 кВт, емкость 50 л). Пользуюсь им с 2011 года в периоды отключения централизованного ГВС. При мощности 2 кВт вода нагревается до 75 градусов, с помощью переключателя можно установить температуру поменьше. Полного бака, нагретого до максимума, хватает, чтобы принять ванну одному человеку или двоим для душа. В целом покупкой доволен».

Ренат, Екатеринбург.

«У меня бойлер Термекс 50 S, мнение о нем сложилось не самое лучшее. Цена, конечно, доступная, но это единственное его достоинство. Объема 50 литров недостаточно для того, чтобы помыться семье из 4-х человек.

Сергей, Саратов.

«2 года назад решил купить для частного дома 80-литровый Термекс, почитав предварительно отзывы и ознакомившись с характеристиками. Монтаж выполнял сам согласно инструкции. Вода у нас жесткая, поэтому даже фильтр не помог замедлить образование накипи. Из-за этого недавно перегорел ТЭН, а цена его немаленькая. Хорошо, что ремонт оказался несложным: разборка и замена заняли не больше часа. На будущее учту: каждые полгода с ТЭНа нужно удалять накипь».

Максим Беляев, Санкт-Петербург.

«У нас ровно 9 лет в круглосуточном режиме проработал бойлер Термекс RZB 80 L. Его достоинства – современный дизайн, бесшумная работа, безотказность. Чтобы не пришлось раньше времени выполнять ремонт, следует раз в год делать профилактику: менять магниевый анод, проверять состояние ТЭНа и мыть его от накипи. А чтобы не лопнул бак, нужно заранее купить клапан для сброса лишней воды».

Любовь, Москва.

Как выбрать бойлер?

Учитывая мнение специалистов и потребителей с многолетним опытом эксплуатации бойлеров от Термекс, приведем основные критерии подбора приборов, произведенных этой компанией.

1. Емкость. Ее выбирают, исходя из числа жильцов и количества сантехнического оборудования. Для средней семьи из трех человек при наличии двух кранов, душа и ванной рекомендуемый объем бака составляет 100 л.

2. Форма. Недостаток плоских водонагревателей – большее число сварных швов, увеличивающих угрозу протекания в связи с коррозией. Более надежными принято считать классические круглые модели. Хотя производитель утверждает, что современная сварочная технология G5 придает швам свойства нержавеющей стали.

3. ТЭН. Лучше купить водонагреватель накопительный Термекс с сухим ТЭНом, у которого нет прямого контакта с водой. Такой элемент бойлера не боится накипи, а если он все же выйдет из строя, его меняют без слива воды.

4. Внутреннее покрытие. Как показывает практика, реже протекают эмалированные баки. Если в процессе сварки нержавейки была нарушена технология, то эмаль становится дополнительной защитой от коррозии.

5. Вид управления. Электроника создает комфортные условия для пользователя, но имеет существенный минус – чувствительность к колебаниям напряжения. Кроме того, слишком большое количество элементов в электронной системе снижает ее надежность. Выход из строя обычно требует полной замены блока: сложный ремонт обойдется слишком дорого. В отдаленных районах с нестабильным электроснабжением лучше предпочесть модель с механическим управлением.

Любая техника имеет ограниченный срок эксплуатации, а магазин дает гарантию всего на год. Чтобы ремонт водонагревателей Термекс не занял слишком много времени и выполнялся специалистами, стоит учесть еще один фактор: наличие в местности проживания официального сервисного центра компании-производителя. В этом случае цена ремонта (как и нужной запчасти при прямых поставках) будет доступнее.

Стоимость

Таблица представляет собой обзор моделей бойлеров, получивших положительные отзывы потребителей.

ТЕРМЕКС CERAMIK 80 V.

На этой странице вы найдёте описание, продавцов и цены, чтобы купить дешевле, видеообзоры и честные отзывы о водонагревателе ТЕРМЕКС CERAMIK 80 V. И можете оставить своё мнение о модели в комментариях.

Быстрый Переход к Нужному Месту:

Технические характеристики

Объем, л	80
Мощность, кВт	2
Напряжение сети, В	220
Установка	вертикальная
Способ крепления	настенный
Внутреннее покрытие бака	стеклофарфоровая эмаль
Наличие сетевой вилки	да
Тип ТЭНа	мокрый
УЗО в комплекте	да
Мах тем-ра нагрева воды, °С	75
Управление	механическое
Самодиагностика	нет
Пульт ДУ	нет
Цвет	белый
Высота, мм	1018
Глубина, мм	293
Ширина, мм	511
Габариты, мм	(ВхГхШ) 1018х293х511
Вес, кг	24
Макс. давление воды, бар	7
Подводка	нижняя
Магниевый анод	да
Степень защиты от воды	IPX4
Материал бака	сталь
Дисплей	нет
Ускоренный нагрев	да
Предохранительный клапан	да
Обратный клапан	есть
Серия	Ceramik
Фильтр для воды	нет
Время нагрева на 45 °C, мин	110
Количество ТЭНов, шт	1
Форма	плоская

Особенности модели

Аккумуляционный электрический водонагреватель Термекс Ceramik 80 V ЭдЭ001635 — электрический бойлер большого литража, предназначенный для накопления холодной воды из центральной магистрали и ее нагрева до температуры максимум 75 градусов. Подходит для раздачи горячей воды на несколько точек. Устройство имеет простое и удобное механической управление, подводка воды — нижняя, работает от стандартной бытовой электросети 220 В. Для экономии электроэнергии есть возможность работы в трех мощностных режимах (0.7/1.3/2 кВт).

• Тип водонагревателя: накопительный;
• Форма водонагревателя: плоская;
• Литраж: 80 л;
• Способ нагрева Термекс Ceramik 80 V ЭдЭ001635: электрический;
• Макс. мощность электрическая: 2000 Вт;
• Режимы мощности электрической: 700/1300/2000 Вт;
• Напряжение сети: 230 В;
• Подключение к стандартной розетке: да;
• Установка: вертикальная;
• Подводка: нижняя;
• Способ крепления: настенный;
• Тип управления: механическое;
• Количество внутренних баков: 2;
• Материал внутреннего бака: биостеклофарфор;
• Материал нагревательного элемента: TitaniumHeat;
• Количество анодов: 1;
• Количество нагревательных элементов: 1;
• Время нагрева на ?t 45°: 110 мин;
• Макс. давление воды: 0.7 МПа;
• Мин. давление воды: 0.05 МПа;
• Макс. температура нагрева воды: 75°С;
• Присоединительный размер: G1/2;
• Ускоренный нагрев: да;
• Тип электрического нагревательного элемента: трубчатый;
• Точки водоразбора: несколько;
• Класс: IPX4;
• УЗО: да;
• Защита от включения без воды: нет;
• Клапан предохранительный: да;
• Термометр: нет;
• Индикация включения: да;
• Индикация нагрева: да;
• Пульт ДУ: нет;
• Дисплей: нет;
• Расстояние между патрубками подключения: 100 мм;
• Расстояние от стены до патрубков подключения: 108 мм;
• Расстояние от крепежных отверстий до патрубков: 859 мм;
• Расстояние между крепежными отверстиями: 372 мм;
• Расстояние между крепежными планками: 677 мм.

Стандартная комплектация

Производитель оставляет за собой право без уведомления представителей менять характеристики, внешний вид, комплектацию товара и место его производства. Будьте внимательны при покупке!

• Водонагреватель;
• Предохранительный клапан типа GP;
• Руководство по эксплуатации;
• Упаковка;
• Анкеры для крепежа;
• Шнур с вилкой и УЗО.

Видео

Отзывы и обзоры

Смотрите видео (выше) и обзоры (ниже), они часто лучше текстовых отзывов. Прочитать больше отзывов или оставить свой вы можете в комментариях к этой странице. Спасибо за ваш отзыв или оценку!

Денис

Хороший водонагреватель. Воду греет без проблем. Работает стабильно уже почти год, я очень доволен.

Цены и продавцы

ТОП-12 лучших моделей и какую выбрать

Итальянская компания Thermex производит бойлеры для нагрева воды с 1949 года, в Россию же производитель попал в 1995 году.

Первоначально было открыто только дилерское отделение, но в 2007 году в Санкт-Петербурге было создано целое производство.

На данный момент, компания изготовливает накопительные водонагреватели разных модельных рядов, отличающиеся объемом, формой, материалом покрытия и способом монтажа.

Содержание статьи

Виды устройств

Водонагреватели Thermex по способу монтажа делятся на:

• вертикальные;
• горизонтальные.

По форме изготовления корпуса накопительные бойлеры Thermex бывают:

• плоскими;
• круглыми;
• широкими;
• узкими.

Фирма производит два типа баков:

• из стали с покрытием биостеклофарфор;
• из нержавеющей стали.

Как выбрать и на что обратить внимание при покупке?

При выборе бойлера данной фирмы важно обратить внимание на следующие характеристики:

• источник для подогрева воды — газовые приборы требуют меньшего потребления электричества, однако электрические стоят дешевле.
• емкость бака — необходимо учитывать количество человек в семье, цели, расходы на душ и стиральную машинку.
• место для установки — накопительные водонагреватели требуют мало места, они могут размещаться как на стене (вертикально), так и под потолком.
• верхнее или нижнее подключение водопровода;
• способ розжига — автоматический, пьезоэлектророзжиг или от батареек;
• мощность — чем больше мощность, тем быстрее будет нагреваться вода.

Рейтинг ТОП-12 лучших моделей

Лучшие накопительные водонагреватели на 30 литров

Thermex Ultra Slim IU 30

Накопительный бойлер электрического способа нагрева (ТЭН) с объемом бака 30 л. При потреблении мощности 2 кВт нагревает воду до 75 градусов.

Имеет несколько точек водоразбора, температура регулируется механическим способом.

Среди дополнительных функций можно выделить индикацию при включении и нагреве воды.

Прибор обладает двумя клапанами — обратным и предохранительным и магниевым защитным анодом.

Размеры водонагревателя: 210*800*285 мм, вес — 12, 6 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• компактный;
• УЗО в комплекте;
• 2 выключателя для выбора мощности нагрева;
• быстро нагревается.

Недостатки:

• короткий шнур питания;
• нагрева воды хватает для 1-максимум 2 человек.

Thermex Flat Plus Pro IF 30V (pro)

Электрический накопительный водонагреватель, который способен нагреть воду до 75 градусов. Прибором удобно управляь на электронной панели.

В дополнительные возможности входят: термометр, самодиагностика, быстрый нагрев, ограничение температуры нагрева и индикация при включении и нагреве.

Система защиты характеризуется функцией предотвращения замерзания и перегрева, УЗО и предохранительным клапаном.

Размеры устройства: 452*575*239 мм, вес — 9, 7 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• электронное управление;
• бак задут пенополиуретаном;
• хорошая стоимость;
• бак из нержавеющей стали.

Недостатки:

• нет режима сохранения настроек;
• кривой патрубок дренажа.

Thermex Mechanik MK 30 V

Водонагреватель на 30 л с электрическим способом нагрева имеет несколько точек водоразбора. Хорошая систем защиты — имеется УЗО и 4 степень блокировки от воды.

Установить водонагреватель можно на стену, как вертикальной, так и нижней подводкой.

Размеры прибора: 434*555*230 мм.

Механическое управление и индикация включения и нагрева воды делает эксплуатацию более удобной.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• красивый внешний вид;
• компактные габариты;
• высокая скорость нагрева воды;
• легко подключить самостоятельно.

Недостатки:

• цена выше среднего.

Лучшие накопительные водонагреватели на 50 литров

Thermex Flat Plus IF 50V (pro)

Электрический накопительный водонагреватель на 50 л способен нагреть воду до 75 градусов. В дополнительные опции включены: дисплей с электронным управлением, термометр, индикация, самодиагностика и ограничение нагревания температуры.

Качественная система защиты от включения без воды и перегрева, есть УЗО, режим предупреждения замерзания и предохранительный клапан.

Кроме этого, в функции прибора включен ускоренный нагрев воды.

Размеры водонагревателя: 452*865*239 мм, вес — 12,6 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• хорошее качество материалов;
• есть гарантия на 7 лет;
• стильный дизайн;
• три режима нагрева.

Недостатки:

• местами пластик может выгнуть;
• сливной штуцер торчит из корпуса криво;
• нагрев включается только при понижении температуры до 8 градусов;
• не сохраняет настройки при выключении.

Thermex Champion Silverheat ERS 50 V

Накопительный водонагреватель, работающий на электричестве потребляет всего до 1,5 кВт. До максимальной температуры нагревается за 105 минут.

Установить можно как вертикальной, так и нижней подводкой, крепится на стену.

Отличная система защиты: УЗО, предохранительный клапан и магниевый защитный анод.

Размеры прибора: 445*527*459 мм, вес — 16,5 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 1,5 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — стеклокерамика;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• быстрый нагрев;
• средний размер устройства;
• недорогой;
• контролирует температуру воды.

Недостатки:

• может потечь бак.

Thermex Solo 50V

Накопительный бойлер, работающий от электрической розетки через шнур питания. Потребляет до 2 кВт при 220 В, нагревает воду до 75 градусов.

Управляется механически, есть индикация при нагреве воды и включении.

Защитная система: УХО, блокировка от перегрева, предохранительный клапан и магниевый защитный анод.

Габариты устройства: 340*762*355 мм, вес — 11,3 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — нержавеюща сталь.

Достоинства:

• удобное табло с индикацией температуры;
• быстрый нагрев;
• аккуратный внешний вид;
• бак из нержавеющей стали;
• удобство подключения.

Недостатки:

• УЗО на кабеле близко к вилке;
• полного бака хватает на 2 человека.

Лучшие накопительные водонагреватели на 80 литров

Thermex Champion Silverheat ERS 80V

Водонагреватель на 80 л потребляет всего1,5 кВт при 220 В. Максимальная температура нагрева воды — 74 градуса. Стеклокерамическое покрытие бака защищает прибор от коррозии.

Устройство имеет настенный вид крепления и вертикальную или нижнюю подводку.

Размеры водонагревателя: 445*751*459 мм, вес — 21,2 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 1,5 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — стеклокерамика.

Достоинства:

• легкий вес;
• есть гарантия от производителя;
• удобный в монтаже;
• УЗО на шнуре питания;
• отличное качество материалов.

Недостатки:

• течет примерно через год использования;
• треск во время работы;
• нагревает не очень быстро.

Thermex Mechanik MK 80 V

Электрический накопительный нагреватель воды с несколькими точками водоразбора (напорный вид). Потребляет до 2 кВт мощности и греет воду до 75 градусов.

В дополнительные режимы входят быстрый нагрев и индикация нагрева и включения.

Нагревательный элемент — ТЭН из меди.

Размеры водонагревателя: 514*993*270 мм.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• защита от окисления;
• три уровня мощности;
• большой объем;
• легко моется;
• простота в управлении.

Недостатки:

• нет индикатора настоящей температуры;
• протекает через год;
• один ТЭН.

Thermex M-SMART MS 80 V

Бойлер на 80 л, работающий на электрическом питании. В арсенале устройства есть полезные режимы: быстрый нагрев, термометр, ограничение температуры нагрева, индикаторы включения и нагрева, а также электронное управление на дисплее.

Потребляемая мощность оборудования — 2 кВт, максимальная температура нагрева воды — 75 градусов.

Размеры стандартные: 514*993*270, вес — 16, 8 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• быстро нагревается;
• красивый дизайн;
• удобное электронное управление;
• индикация;
• 7 лет гарантии;
• нагревает полный бак всего за час.

Недостатки:

• бак течет через год;
• довольно высокая цена.

Лучшие накопительные водонагреватели на 100 литров

Thermex M-SMART MS 100 V

Крупногабаритный водонагреватель накопительный с баком объемом 100 л. Потребляет до 2 кВт электричества и нагревает температуру до +75 градусов.

Температура нагрева, включение/выключение регулируются при помощи электронного дисплея.

Среди дополнительных опций сожно выделить наличие термометра, индикацию, предупреждение нагрева температуры.

В систему защиты входят: УЗО, предохранительный и обратный клапаны, а также 4-ая степень защита от воды.

Размеры прибора: 514*1203*270, вес — 20 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• плоская конструкция;
• электронный дисплей;
• многоуровневая защита;
• отличное качество материалов.

Недостатки:

• может потечь;
• довольно высокая стоимость.

Thermex Nova 100 V

Бойлер с баком на 100 л обеспечит целую семью горячей водой. Прибор нагревает воду до +75 градусов всего за час с небольшим.

Имеет механическое регулирование температурой, индикацию при включении и нагреве, а также хорошую защиту — УХО, предохранительный клапан и магниевый защитный анод.

Внутреннее покрытие бака сделано из стеклокерамики, что предотвращает коррозию элемента.

Размеры водонагревателя: 445*903*459 мм, вес — 24, 4 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — стеклокерамика;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• невысокая стоимость;
• есть гарантия на 7 лет от производителя;
• качественные материалы;
• быстрый нагрев.

Недостатки:

• термометр «зависает»;
• может протекать бак.

Thermex Flat Plus Pro IF 100V (pro)

Накопительный электрический прибор для нагрева воды объемом 100 л. Вид — напорный, имеет несколько точек нагрева воды до 75 градусов.

Управление устройством — электронное, есть индикация включения и увеличения температуры воды, дисплей, термометр, самодиагностика.

Габариты прибора: 510*1240*268 мм, вес — 18, 8 кг.

Технические характеристики:

• нагрев — электрический;
• мощность — 2 кВт;
• ориентация — вертикальная, нижняя подводка, настенная;
• покрытие бака внутри — нержавеющая сталь;
• материал элемента нагрева — медь.

Достоинства:

• удобное электронное управление;
• отличное качество всех элементов;
• быстрый нагрев температуры.

Недостатки:

• высокая стоимость;
• занимает много места.

Отзывы покупателей

Полезное видео

Из видео вы ознакомитесь с обзором водонагревателя Thermex:

Вконтакте

Facebook

Twitter

Google+

Одноклассники

Водонагреватель накопительный Термекс MS 50 V (pro) отзывы

Серия М-SMART pro — новый суперплоский водонагреватель с сухим нагревательным элементом и фирменным плоским корпусом, который отлично подходит для создания системы локального горячего водоснабжения в современных городских квартирах. Компактный водонагреватель отлично вписывается интерьер, занимает мало места, быстро нагревает воду до выбранной температуры и стабильно работает долгие годы. Внутренний бак водонагревателя изготовлен по технологии G.5 из нержавеющей стали с качественными легирующими добавками с учетом всех особенностей стали, так что водонагреватель стабильно работает в любой воде и устойчив к коррозии даже при интенсивной эксплуатации. Внутри водонагревателей Thermex M-Smart Pro установлен нагревательный элемент InoxDryHeat — колба из нержавеющей стали с двумя ТЭНами внутри. Колба устойчива к коррозии и защищает ТЭНы от воздействия воды, делая их более долговечными. Двойной нагревательный элемент имеет 3 варианта мощности — 800, 1200 и 2000 Вт (в моделях MS 50 V Pro, MS 80 V Pro, MS 100 V Pro) — или 1500 Вт для модели MS 30 V Pro, а в случае необходимости, замена ТЭНов проходит без слива воды.Благодаря технологии Double Tank внутренний бак Thermex M-Smart Pro представляет собой два соединенных между собой цилиндра, что делает корпус водонагревателя узким. Плоский водонагреватель отлично подходит для компактного размещения и выглядит стильно и современно. В комплекте с водонагревателем M-Smart Pro идет устройство защитного отключения на сетевом шнуре, а также предохранительный клапан для сброса излишков давления и защиты от возвращения нагретой воды в магистраль водоснабжения.

Технические характеристики

Бойлер Thermex Mystery 20 V отзывы покупателей и специалистов на отзовик

Водонагреватель Бойлер Thermex Mystery 20 V

Краткие характеристики:

Пользователям нравится:

магниевый анод

бак из нержавейки

Общая оценка: 

Водонагреватель Бойлер Thermex Mystery 20 V отзывы

На длительное пользование рассчитывать не стоит, но на два года- вполне достаточен. Выбор за вами.. Добавлю, что проводил анализ воды: кислотность повышена РН 4.9. Накипь отсутствует..

Цена приемлемая, ТЭН надёжный- 2 года служит точно..

Недостатки:

Бак течёт от сквозной коррозии ровно через 2 года- покупал 2 штуки, один в 02.2015- потёк в 07.2017г. Поменял на точно такой же, 11.2019г. потёк второй бак. Сам бак состоит из двух шарообразных половин, вот на их соединении и происходит коррозия.. Больше этой фирмы брать не буду…

Только с этой фирмой дружу не разу не подвадила

Маленький компактный надёжный,

Недостатки:

Нет

Только с этой фирмой дружу не разу не подвадила

Маленький компактный надёжный,

Недостатки:

Нет

Брал на дачу т.к. устал выслушивать от домашних жалобы на холодную воду, да и сам привык уже к городскому комфорту, и умываться в ледяной воде — так себе развлечение. Поначалу думал, что 15 литров будет маловато, а большие бойлеры ставить было некуда, этот же бойлер по габаритам идеально умещался под мойку. Как показала практика, 15 литров вполне достаточно для дачных нужд. Помыть посуду и умыться с утра хватает, а из-за небольшого объема вода нагревается очень быстро. Чтобы было удобно сливать воду на зиму, на вводе поставил дополнительные краны — ничего разбирать не приходится. По мне, так идеальный дачный бойлер за свои деньги.

Небольшая цена Малый объем Простой монтаж Высокое качество

Пользуюсь водонагревателем 3 года в период отключения горячей воды. Работает хорошо, отказов не было.

Узкий, удобное табло.

Недостатки:

Недостатков не заметил.

Лилия Сабитова

Незаменимая вещь в доме на сезонные перебои с водой. Отличный дизайн, хороший объем, быстрый нагрев. Был куплен в Корпорации Центр по акции, да ещё и в рассрочку. Здорово! Рекомендую! Хороший магазин, хороший товар!

Классный дизайн, хороший объем, быстрый нагрев.

Недостатки:

Нет

Советую.

1. Хороший объем, 50л. 2. Понравился дизайн, компактный. 3. Безопасный. Защита — ограничение температуры нагрева, магниевый анод, защита от перегрева, обратный клапан. Внутреннее покрытие бака — нерж. сталь 4. Удобство, комфорт. Незаменимая вещь при сезонных отключениях горячей воды. 5. Экономия времени, например, с утра. Нет необходимости греть кастрюльку. 6. Нравится цифровой дисплей, удобно контролировать уровень температуры. Легко управлять. 7. Несколько режимов нагрева, что экономит также время.

Недостатки:

Нет.

В такой ценовой категории ему равных нет. Очень рекомендую

Очень хороший водонагреватель. Уже не первый покупаю и имел фирмы Термекс. Греет быстро, надежный

Недостатки:

Нет

Что буду брать Thermex вопросов не было! Определялся именно с дизайном, выглядит отлично. Купил ну совсем очень дешево, за 9 тыс + чайник скарлет в подарок. У нас в строительных магазинах он стоит 13 тыс. Так что следите за скидками в корпорации центр.

Качество, отличный бренд. Дизайн на высоте. Электронное управление, два режима.

Недостатки:

У этого бренда недостатков нет, работают годами

Полезное приобретение

Порадовала быстрая доставка. Достоинства: возможность регулировки температуры, компактность по сравнению с предыдущими моделями

Недостатки:

Воду не экономлю и 50 литров мне хватает лишь на минут 15

Оставьте свой отзыв на Бойлер Thermex Mystery 20 V

Оставить отзыв

Спасибо за отзыв. 

Он будет опубликован после проверки модератором!

О работе — Наши цели, правила и приоритеты в отнощениях с черными работодателями и их сотрудниками

1. Данный проект является ярким представителем свободы слова и не подвержен стороннему влиянию третьих лиц (преследование, запугивание, шантаж и т.д.).
2. Мы гарантируем авторам отзывов, что их права будут отстаиваться, несмотря на давление извне. Однако стоит отметить, что ненормативная лексика не индексируется поисковиками.
3. Беспрепятственно удалить отзыв может только его автор, указавший e-mail при заполнении.
4. Мы никому не предоставляем без предварительного согласия самого автора, информацию о нём, как о посетителе нашего сайта (IP адрес, e-mail, другую информацию).
5. Любой человек, кроме директора компании-работодателя имеет право удалять свои персональные данные из отзывов или из комментариев, не назвавших себя авторов.
6. Мы «доверяем» всем авторам, оставившим у нас отзывы. Если вы с чем-то не согласны, то у вас всегда есть возможность опровергнуть отзыв, добавив комментарий к нему.
7. Администрация сайта не несет никакой ответственности за размещенные на нем отзывы о работодателях, однако мы всегда готовы к рассмотрению неадекватных произведений.
8. Целью сайта является составление как можно более ёмкой коллекции положительных и отрицательных отзывов о работе в как можно большем количестве компаний.
9. А это в свою очередь служит всего лишь для одной цели – поиску подходящей компании в плане условий работы и профессионального роста!
10. Вы можете использовать информацию с нашего сайта в своих целях. Обязательное условие – наличие ссылки на источник информации следующего вида:
    • в интернете (гиперссылка) – <a href=»http://orabote.net/»> oRabote.net — Отзывы о работе. Черный список работодателей</a> (ссылка должна быть прямой, использование редиректов запрещено),
    • в печатных изданиях – «По материалам сайта oRabote.net»

Мы искренне надеемся, что сайт поможет Вам в поиске работы. Спасибо!

Подворье — садовый центр в Москве

Добрый вечер, уважаемое Подворье! Вчера получила заказ 656776.Восторгу нет предела((( У гортензии листья больные, большая их часть лежала на дне коробки, цветочные шапки блеклые, безжизненные, земл…

Добрый вечер, уважаемое Подворье! Вчера получила заказ 656776.Восторгу нет предела((( У гортензии листья больные, большая их часть лежала на дне коробки, цветочные шапки блеклые, безжизненные, земля в горшке сухущая, аж отошла от стенок горшка. Вы бы сами купили такое растение?

1 Сентября, 2021 / Вероника, Уфа

Яблоня сорта Vuokko приобретена в Подворье в 2019г 3-х летка в 7л.контейнере. В этом году дала первый урожай в несколько яблочек. Я в восторге от сорта. Первое яблочко попробовала в середине август…

Яблоня сорта Vuokko приобретена в Подворье в 2019г 3-х летка в 7л.контейнере. В этом году дала первый урожай в несколько яблочек. Я в восторге от сорта. Первое яблочко попробовала в середине августар ещё недозрелым, оказалось очень даже съедобным. К 25 авг. съеден весь урожай, т.к. под Серпуховом созрели, зернышки коричневые, бочек розовый, очень сочное, хрустящее (не как картошка) , сладкое, с совсем лёгкой освежающей кислинкой.

24 Августа, 2021 / Татьяна

Роза у меня растёт первый год. Очень хотелось оранжевую розочку! Сразу хочу сказать, что приживалась с трудом, так же как и другая Barni, очень хилые растения. Когда в июне немецкие розы, посаженн…

Роза у меня растёт первый год. Очень хотелось оранжевую розочку! Сразу хочу сказать, что приживалась с трудом, так же как и другая Barni, очень хилые растения. Когда в июне немецкие розы, посаженный в один год с ними, уже стояли высотой около 40-50 см, эти еле-еле отходили. Все бутоны первой волны я отрезала, чтобы не ослаблять ее и дать возможность набрать силу. Сейчас в августе она полностью окрепла и цветёт. Роспуск красивый, розово-огоньковый, серединка желтоватая. Но вот в середине и конце цвет становится светло-розово-лососевым. Очень банальный и неинтересный. Посадка полдня в тени, полдня на солнце, комфортная. Бутон способен держаться долго, больше недели, но поскольку цвет не очень, я его срываю раньше. Заявленный сильный аромат отсутствует, пахнет просто растением, даже не розой. В общем разочарована!

16 Августа, 2021 / Татьяна

Ирисы оказались совсем засушенными, трудно представить, как они могут прижиться…

Ирисы оказались совсем засушенными, трудно представить, как они могут прижиться…

27 Августа, 2021 / Вера, Москва

Добрый день. Весной покупала лилию Элюзив. Лилии выросли, но выглядели не в соответствии с описанием сорта. Цвет был белый с желтой серединой, а должен быть розовый, желтый, оранжевый, красноватый …

Добрый день. Весной покупала лилию Элюзив. Лилии выросли, но выглядели не в соответствии с описанием сорта. Цвет был белый с желтой серединой, а должен быть розовый, желтый, оранжевый, красноватый с крапом. Цветки опущены вниз, а должны быть с направлением в верхнюю сторону. Лепестки должны быть с волнистыми краями. Выросшие у меня цветы не плохи, но хотелось все-таки в соответствии с описанием.

30 Августа, 2021 / Ольга, Москва

Отличный садовый центр, продавцы-консультанты всегда готовы помочь с выбором, профессионально проконсультируют по всем возникающим вопросам.

Отличный садовый центр, продавцы-консультанты всегда готовы помочь с выбором, профессионально проконсультируют по всем возникающим вопросам.

20 Августа, 2021 / Вероника

Получила 3саженца груш в контейнере.Не смотря с задержкой на три дня саженцы пришли в отличном состоянии.Спасибо Вам «Подворье».Не первый раз покупаем у вас,и всегда всё отлично.

Получила 3саженца груш в контейнере.Не смотря с задержкой на три дня саженцы пришли в отличном состоянии.Спасибо Вам «Подворье».Не первый раз покупаем у вас,и всегда всё отлично.

6 Сентября, 2021 / Ольга, Волгоград

Прекрасная. Энергично растет, не болеет, красивый и гармоничный куст. Посадка осени 20 года (брала здесь) сейчас где-то метр ширина и 80 см высота. Цветет постоянно.

Прекрасная. Энергично растет, не болеет, красивый и гармоничный куст. Посадка осени 20 года (брала здесь) сейчас где-то метр ширина и 80 см высота. Цветет постоянно.

12 Августа, 2021 / Ангелина, Алексеевка, Алексеевский район, Белгородская обл.

Как всегда всё отлично! Спасибо за вашу работу!!!

Как всегда всё отлично! Спасибо за вашу работу!!!

9 Сентября, 2021 / Нина, Одинцово

А вот это — зверь. Рекомендую!!

А вот это — зверь. Рекомендую!!

12 Августа, 2021 / Зоя

Хороший перец.

Хороший перец.

30 Августа, 2021 / Марина, Долгопрудный

Шикарная роза, к концу второго года метр высота и ширина, две волны и море цветов в обе. На Урале зимует отлично!

Шикарная роза, к концу второго года метр высота и ширина, две волны и море цветов в обе. На Урале зимует отлично!

7 Сентября, 2021 / Наталья

Terminix (2021) — Этот старый дом

Если вы ищете услуги по борьбе с вредителями, вы наверняка встречали Terminix. Известная компания и лидер отрасли занимается борьбой с вредителями более 90 лет и обслуживают 2,8 миллиона частных и коммерческих клиентов, защищая от муравьев, тараканов, термитов, постельных клопов и многого другого. Terminix гордится своим опытом и передовыми технологиями — это была первая компания, получившая патент на борьбу с термитами.

Если вы хотите получить расценки от Terminix, заполните эту онлайн-форму или позвоните по указанному ниже номеру.

Мы дали Terminix оценку 98,5 / 100, это наивысший балл среди всех рассмотренных нами компаний. Однако мы всегда рекомендуем обратиться к нескольким компаниям, прежде чем принимать окончательное решение.

Продолжайте читать наш обзор Terminix, чтобы узнать об услугах компании, ее местонахождении, рейтингах клиентов и многом другом, а также определить, подходит ли вам Terminix.

Плюсы и минусы Terminix

Планы и услуги Terminix

Terminix предлагает несколько тарифных планов, которые различаются в зависимости от региона и местного отделения.Общий план борьбы с вредителями предлагается по всей стране и включает ежеквартальные услуги. Чтобы узнать общие цены на борьбу с вредителями, позвоните в местное отделение Terminix. В дополнение к своему общему плану борьбы с вредителями, Terminix предлагает ежемесячную или разовую услугу по борьбе с комарами, а также ежемесячную или разовую услугу по борьбе с насекомыми.

План борьбы с вредителями

Общий план борьбы с вредителями включает в себя один комплексный внутренний и внешний осмотр и обработку, сезонные последующие наружные обработки (запланированные ежеквартально или раз в два месяца), обученных и застрахованных технических специалистов и Terminix Promise ™.

С Terminix Promise ™ Terminix вернется для проведения осмотра и дополнительных обработок без дополнительных затрат, если вы обнаружите, что вредители вернулись между обработками. Terminix Promise Plus ™ доступен для подходящих домов в рамках расширенного и премиального планов компании, а это означает, что, пока вы сохраняете свой план, Terminix будет «покрывать любые дополнительные процедуры и устранять любые новые повреждения термитов».

Общий план борьбы с вредителями защищает клиентов от 13 распространенных домашних вредителей:

Terminix также защищает от большого количества других вредителей, но вам нужно будет планировать обработку от них по меню.

Примечание: Если вредители вернутся в любое время между запланированными визитами, технический специалист Terminix вернется к вам домой без дополнительных затрат.

Quick Guard® Mosquito Service

В этой ежемесячной услуге используется активный ингредиент, который немедленно уничтожает комаров, и, по словам Термикс, «в 3 раза сильнее, чем многие широко используемые продукты на рынке». После первоначального осмотра технический специалист создаст индивидуальный план лечения, основанный на районах, где могут жить и размножаться комары.Одна процедура создаст защитную зону, которая сохраняется в течение нескольких недель благодаря специальному полимеру, который защищает активный ингредиент от воды и погодных условий.

Одноразовая москитная служба включает только одно приложение защиты от комаров.

Tick Defend System ™

Четырехэтапный подход этой службы направлен на борьбу с распространенными видами клещей, используя двойную обработку жидкости и гранул, которые создают барьер против вредителей. Лечение немедленно устраняет клещей.

Система одноразовой защиты от клещей включает всего одну обработку от клещей.

Контроль термитов

Terminix стремится остановить заражение термитами до того, как они начнутся, с его системой защиты от термитов OnGuard®. Эта система разбита на четыре этапа:

1. Специалисты Terminix устанавливают встроенные станции на расстоянии 10-15 футов друг от друга в почве вокруг вашего дома, чтобы создать зону защиты.
2. Приманки немедленно начинают работать, чтобы перехватить термитов, привлекая их веществом, которое они считают более привлекательным, чем древесина в вашем доме.
3. Термиты питаются наживкой и возвращаются с ней в свою колонию, уничтожая оставшуюся популяцию.
4. Ваш опытный техник проводит ежегодные проверки, чтобы контролировать станции на предмет признаков активности термитов.

Существует трехуровневых планов защиты от термитов , которые вы можете выбрать — Базовый, Расширенный и Премиум.

• Basic Plan : Включает OnGuard® Termite Protection System и Terminix Promise ™.
• Расширенный план : Включает систему защиты от термитов OnGuard®, Terminix Promise ™ и Terminix Promise Plus ™ .
• План Premium : Включает систему защиты от термитов OnGuard®, Terminix Promise ™, Terminix Promise Plus ™ и постоянную борьбу с вредителями.

* Terminix Promise ™ заявляет, что если вредители вернутся между обработками, Terminix предоставит вам дополнительные услуги без каких-либо дополнительных затрат.

* В заявлении Terminix Promise Plus ™ указано, что до тех пор, пока вы соблюдаете свой план, Terminix покроет любые дополнительные процедуры и устранит любые новые повреждения термитов.

Удаление клопов

Terminix предлагает индивидуальные средства лечения клопов, чтобы устранить всех клопов там, где они живут и размножаются. Во-первых, технический специалист Terminix бесплатно проведет тщательный осмотр вашего дома с поиском кроватей, мебели и постельного белья. Затем техник удалит видимых клопов и обработает область, чтобы уничтожить все скрытые клопы и яйца.Terminix использует множество методов, в том числе пар, кожухи и устройства для мониторинга, а также нетоксичный раствор RapidFreeze®.

Terminix поддерживается Гарантией от постельных клопов. С этой гарантией Terminix вернется и проведет осмотр и дополнительные процедуры без каких-либо дополнительных затрат в тех случаях, когда вы обнаружите доказательства наличия клопов в своем доме в течение шести месяцев после первоначального лечения.

Термикс Расположение

Terminix предоставляет услуги в 47 штатах, кроме Аляски, Северной Дакоты и Южной Дакоты.

Terminix Стоимость

Terminix обычно колеблются от 550 до 700 долларов в год за дом площадью 2000 квадратных футов. Услуги по продаже комаров начинаются примерно с 60 долларов в месяц, а услуги по продаже клещей — от 80 долларов в месяц. Точная стоимость вашего лечения Термиксом будет зависеть от нескольких факторов.

• Заражение —Если у вас полномасштабное заражение, его лечение будет стоить дороже.
• Тип вредителей — Устранение одних вредителей обходится дороже, чем других.
• Размер вашего дома —Более крупный дом будет стоить дороже.
• Тип лечения —Некоторые обширные процедуры обходятся дороже, чем менее сложные.
• Количество процедур — Вопросы, требующие последующего лечения, будут стоить дороже.

Прежде чем предоставить вам расценки на лечение термитов или постельных клопов, Terminix должен будет провести бесплатный осмотр дома, чтобы определить цены.

Чего ожидать от Terminix

Когда вы планируете бесплатную проверку с Terminix, представитель запрашивает следующую информацию:

• Телефон
• Телефонный код
• Вне зависимости от того, являетесь ли вы домовладельцем
• Тип дома
• Размер дома
• Вид оплаты
• Номер кредитной или дебетовой карты и срок ее действия

Затем представитель объяснит процесс проверки.С Terminix проверка занимает от 30 минут до часа, и технический специалист компании прибудет в течение двух-трех часов после вашего приема на осмотр. Из-за этого мы рекомендуем выделить часть своего дня, чтобы дождаться, пока техник выполнит осмотр.

Во время осмотра термитов, в частности, технический специалист будет искать признаки активности или заражения термитами, потенциальные точки доступа термитов и условия, которые могут привести к будущим заражениям термитами в вашем доме.Они могут проверить стены вашего гаража, под домом, на чердаке и под раковинами.

После завершения проверки технический специалист предоставит вам для подписания договор на обслуживание. В зависимости от вашей проблемы с вредителями, услуга по борьбе с вредителями, предлагаемая Terminix, вероятно, будет представлять собой годовую программу, включающую шесть обработок (одна обработка каждые два месяца), чтобы прервать жизненный цикл вредителя, с которым вы имеете дело.

Terminix Обзоры

Terminix аккредитован в Better Business Bureau (BBB) ​​и имеет рейтинг C +.Однако даже у лучших компаний по борьбе с вредителями есть отрицательные отзывы в Интернете. Вот пара отзывов о Термиксе с BBB:

«Отличный сервис, прекрасная политика обслуживания. Мы заставляли их заботиться о наших нуждах в доме в пустыне в течение 15 лет и ни разу не пожалели об этом решении. Лучшее в своем деле. Наш техник Кевин — как семья. ОН лучший в своем деле! » — Дебра У.

«Мне было невероятно легко назначить встречу для моей мамы. Я не собирался быть на месте, и мне сказали, сколько это будет стоить аванс.Осмотрели и ничего не нашли. Они мне перезвонили и сказали. Я ценю их честность и профессионализм ». — Том Т.

Мы также получили этот отзыв от двух наших читателей:

«Услуги Термикс варьируются в зависимости от местного офиса, и наш местный офис ужасен. Никогда не перезванивайте, менеджеры не отвечают на звонки, агенты не отвечают на звонки, сервисные агенты, которым все равно «. — Дориан С.

«Я потратил более 1300 долларов на« службу коричневых отшельников Термикса ».«Они предложили возмещение ~ 10%, поскольку они явно не знают, как управлять коричневыми пауками-отшельниками. Это ужасно, пожалуйста, не используйте Термикс, если у вас проблема с коричневым пауком-отшельником ». — Маркус О.

Terminix против конкурентов

Полезно сравнить Terminix с другими компаниями на рынке. Ниже мы собрали 3 лучших провайдера, чтобы помочь вам принять решение.

Наше заключение

Команда этого старого дома дает Термиксу общую оценку 98.5 из 100 по ключевым показателям, включая варианты планов, доступность состояния, надежность, обслуживание клиентов и дополнительные преимущества. Terminix предлагает широкий спектр услуг, но, что наиболее важно, компания ориентирована на своих клиентов. В целом, мы считаем, что у Terminix лучшее обслуживание клиентов и что это одна из лучших компаний по борьбе с вредителями в отрасли.

Нам очень понравилась функция онлайн-чата Terminix, которая позволяет домовладельцам общаться с представителем Terminix в режиме реального времени.Мы открывали чаты по разным поводам и всегда получали оперативную и информативную услугу, будь то детали плана, доступность плана или гарантии Термикс. Представитель очень хотел работать с нами, прося прислать снимок экрана конкретной страницы Terminix, чтобы он мог помочь нам в устранении неполадок. Эта приверженность обслуживанию клиентов очень много значит в индустрии борьбы с вредителями.

Информация о компании

• Название компании : Terminix
• Тип компании : Государственный
• Генеральный директор : Нарен Гурсахани
• Год основания : 1927
• Штаб-квартира : 150 Пибоди Плейс, Мемфис, TN 38103
• Государственная доступность : 47
• Рейтинг BBB : C +

Наша методология рейтинга

Команда проверки этого старого дома ценит точность, прозрачность и доверие.Мы создали тщательную и объективную рейтинговую систему и оценили каждую компанию по борьбе с вредителями на основе нашей методологии.

Мы часами изучали компании, разговаривая с представителями и техническими специалистами напрямую по телефону, по электронной почте и в чате, чтобы получить самую свежую и полезную информацию о планах, расходах и многом другом.

Наконец, мы создали систему ранжирования для определения лучших компаний по борьбе с вредителями, используя такие ключевые критерии, как количество и тип планов, доступность в штате, обслуживание клиентов и многое другое.Более подробную информацию вы можете найти здесь.

Часто задаваемые вопросы о Terminix

Стоит ли Термикс?

Terminix — достойный выбор для профессиональных служб борьбы с вредителями. Этот лидер отрасли имеет многолетний опыт и предлагает комплексную общую борьбу с вредителями, а также специализированные услуги от термитов, постельных клопов, клещей и комаров.

Сколько стоит Термикс?

Стоимость услуг Terminix будет варьироваться в зависимости от множества факторов, включая тип вредителя, с которым вы имеете дело, серьезность вашего заражения, тип лечения, который вы выбираете, количество необходимых обработок и размер вашей собственности. .Средний диапазон цен на лечение дома площадью 2000 квадратных футов составляет 550-700 долларов в год. Чтобы получить точную цену, Термиксу необходимо будет провести осмотр дома.

Какие ошибки устраняет Terminix?

В своем общем Плане борьбы с вредителями Terminix защищает от платяной моли, тараканов, домашних муравьев, мышей, крыс, скорпионов, серебрянных рыб, неопасных пауков, уховерток, многоножек, многоножек, домашних сверчков и бумажных ос. Термикс также убивает термитов, клопов, клещей и комаров.

Чтобы поделиться отзывами или задать вопрос об этой статье, отправьте сообщение нашей группе обзоров по адресу [email protected] .

Водонагреватели «Термекс»: отзывы, виды, преимущества

С наступлением теплого сезона многие жильцы многоквартирных домов сталкиваются с проблемой наличия горячей воды. За время проведения спецслужбами проверки тепловой сети душевая кабина превращается в сложный процесс с помощью разного рода подручных средств, таких как умывальники, совки и т. Д.Самым простым выходом из этой ситуации станет использование газовых и электрических приборов для нагрева воды. Но лучший вариант — водонагреватель «Термекс», отзывы о котором исключительно положительные.

Какие бывают водонагреватели «Термекс»?

Проточные водонагреватели

Довольно большой мощности имеют проточные водонагреватели «Термекс». Отзывы, размещенные на сайте производителя, дают право утверждать, что данные устройства являются наиболее распространенными на постсоветском пространстве среди тех, чья производственная мощность составляет 25 кВт. С помощью обычных устройств этого получить нельзя.

Накопительные обогреватели

Второй тип таких устройств — водонагреватель «Термекс», отзывы о котором неоднозначны. Некоторые пользователи этого типа устройств жалуются, что для установки такого устройства требуется много места. Сразу отметим, что эта информация не является достоверной, так как на сегодняшний день существуют компактные устройства объемом менее 30 литров. Как можно догадаться по названию, устройство этих устройств предполагает наличие резервуара, в котором нагревается вода.

Таким образом, можно сказать, что водонагреватели «Термекс», отзывы о которых многочисленны, являются достаточно востребованным товаром на рынке устройств для нагрева воды.Причина, по которой они заслуживают большого доверия людей, — это доступная цена и хорошее качество, что является лучшим сочетанием для любого продукта, который в настоящее время присутствует на рынке.

Безопасность | Стеклянная дверь

Мы получаем подозрительную активность от вас или кого-то, кто пользуется вашей интернет-сетью. Подождите, пока мы подтвердим, что вы настоящий человек. Ваш контент появится в ближайшее время. Если вы продолжаете видеть это сообщение, напишите нам чтобы сообщить нам, что у вас возникли проблемы.

Nous aider à garder Glassdoor sécurisée

Nous avons reçu des activités suspectes venant de quelqu’un utilisant votre réseau internet. Подвеска Veuillez Patient que nous vérifions que vous êtes une vraie personne. Вотре содержание apparaîtra bientôt. Si vous continuez à voir ce message, veuillez envoyer un электронная почта à pour nous informer du désagrément.

Unterstützen Sie uns beim Schutz von Glassdoor

Wir haben einige verdächtige Aktivitäten von Ihnen oder von jemandem, der in ihrem Интернет-Netzwerk angemeldet ist, festgestellt.Bitte warten Sie, während wir überprüfen, ob Sie ein Mensch und kein Bot sind. Ihr Inhalt wird в Kürze angezeigt. Wenn Sie weiterhin diese Meldung erhalten, informieren Sie uns darüber bitte по электронной почте: .

We hebben verdachte activiteiten waargenomen op Glassdoor van iemand of iemand die uw internet netwerk deelt. Een momentje geduld totdat, мы узнали, что u daadwerkelijk een persoon bent. Uw bijdrage zal spoedig te zien zijn. Als u deze melding blijft zien, электронная почта: om ons te laten weten dat uw проблема zich nog steeds voordoet.

Hemos estado detectando actividad sospechosa tuya o de alguien con quien compare tu red de Internet. Эспера mientras verificamos que eres una persona real. Tu contenido se mostrará en breve. Si Continúas recibiendo este mensaje, envía un correo electrónico a para informarnos de que tienes problemas.

Hemos estado percibiendo actividad sospechosa de ti o de alguien con quien compare tu red de Internet. Эспера mientras verificamos que eres una persona real.Tu contenido se mostrará en breve. Si Continúas recibiendo este mensaje, envía un correo electrónico a para hacernos saber que estás teniendo problemas.

Temos Recebido algumas atividades suspeitas de voiceê ou de alguém que esteja usando a mesma rede. Aguarde enquanto confirmamos que Você é Uma Pessoa de Verdade. Сеу контексто апаресера эм бреве. Caso продолжить Recebendo esta mensagem, envie um email para пункт нет informar sobre o проблема.

Abbiamo notato alcune attività sospette da parte tua o di una persona che condivide la tua rete Internet.Attendi mentre verifichiamo Che sei una persona reale. Il tuo contenuto verrà visualizzato a breve. Secontini visualizzare questo messaggio, invia un’e-mail all’indirizzo per informarci del проблема.

Пожалуйста, включите куки и перезагрузите страницу.

Это автоматический процесс. Ваш браузер в ближайшее время перенаправит вас на запрошенный контент.

Подождите до 5 секунд…

Перенаправление…

Заводское обозначение: CF-102 / 691964e3c87335b3.

Последствия для здоровья человека от длительного воздействия пестицидов.Обзор литературы 1975-1991 гг.

Была проанализирована научная литература, опубликованная за период 1975-1991 гг. По долгосрочным последствиям для здоровья от длительного воздействия пестицидов, с целью документального подтверждения уровня знаний о смертности и заболеваемости групп населения, подвергшихся воздействию пестицидов. Конкретные цели обзора заключались в том, чтобы определить (1) какие группы населения были исследованы более широко, (2) какие неблагоприятные эффекты были последовательно связаны с конкретным воздействием пестицидов, (3) какие пестициды вызывают озабоченность и (4) какие последствия для здоровья потребуют особого внимания в будущих исследованиях.Литература по острым эффектам и исследованиям токсикологии на животных в этой монографии вообще не рассматривались. За интересующий период опубликовано 440 статей. За исключением 97 обзоров и небольшого количества отчетов о случаях, примерно половина исходных исследований проводилась по схеме случай-контроль (n = 108), в то время как остальные статьи сообщали о результатах пропорциональной смертности (n = 10), когорте (n = 66) или кросс-секционные исследования (n = 51), проведенные на лиц, применяющих пестициды (n = 48), сельскохозяйственных рабочих (n = 26) или людей, занятых в промышленности по производству пестицидов (n = 50).Большинство исследований случай-контроль относились к случаям рака из различных локализаций, особенно к миелолимфопролиферативным заболеваниям (MLP) и саркомам мягких тканей (STS). Было обнаружено, что по сравнению с населением в целом общая смертность постоянно ниже среди производителей пестицидов, а также среди других групп рабочих. Это наблюдение в основном объясняется «эффектом здорового рабочего» или, в случае сельскохозяйственных рабочих, более здоровым образом жизни фермерских семей. За исключением случаев смерти от несчастных случаев, нераковые причины смерти (в основном сердечно-сосудистые заболевания), как правило, встречаются реже, чем ожидалось, среди производителей или пользователей пестицидов, особенно среди фермеров.Среди производителей или разработчиков пестицидов не было получено убедительных доказательств того, что смертность от рака в мире отличается от смертности населения в целом. С другой стороны, исследованные документы поразительно последовательно сообщают о низком общем риске рака среди сельскохозяйственных рабочих; Образ жизни, чистый воздух, низкая распространенность курения были выдвинуты, чтобы объяснить это наблюдение. Многочисленные исследования рассматривали возможную связь между воздействием феноксигербицидов и возникновением определенных типов рака, особенно нарушений STS и MLP.(АННОТАЦИЯ, ОБРЕЗАННАЯ ДО 400 СЛОВ)

Многолетний бывший курильщик — Определение (v1) Лорен Кок

{{PublicationType | capitalize}} рейтинг

Qeios ID: {{публикации.qeios_id}}

Авторские права: © {{PublicationYear}} {{publishing.presentation_authors [0] .full_name + (publishing.presentation_authors.length> 1? ‘Et al’: »)}}. Это публикация в открытом доступе, распространяемая на условиях CC BY 4.0 Лицензия, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Проверьте {{PublicationType | capitalize}} Источник информации об авторских правах и лицензии.

Связанные определения ({{публикации.ranked_siblings.length}})

Спасибо за ваш вклад в сообщество.

Долгосрочные культуры Ex vivo и визуализация в реальном времени имагинальных дисков личинок дрозофилы

Abstract

Непрерывная визуализация живых тканей обеспечивает четкую временную последовательность биологических событий. Имагинальные диски Drosophila были популярными экспериментальными объектами для изучения широкого спектра биологических явлений, но длительное культивирование, позволяющее нормальное развитие, не было удовлетворительным.Здесь мы сообщаем о методе культивирования, который может поддерживать нормальное развитие в течение 18 часов и позволяет получать изображения в реальном времени. Этот метод проверен на нескольких дисках, а также на пролиферацию, дифференциацию и миграцию клеток. Однако он не поддерживает рост диска и не может поддерживать пролиферацию клеток более 7–12 часов. Мы наблюдали за клеточным поведением базальной глии сетчатки в развивающемся глазном диске и обнаружили, что отдельный тип глии имеет отличные свойства пролиферации и миграции. Живое изображение предоставило прямое доказательство того, что оборачивающая глия дифференцировалась от существующей глии после миграции на передний фронт, и неожиданно было обнаружено, что они подвергаются эндорепликации до обертывания аксонов, и их ядра мигрируют вверх и вниз по аксонам.УФ-индуцированное специфическое мечение одной ковровой глии также показало, что две мембраны ковровой глии не перекрываются, и предполагает механизм укладки или отталкивания между двумя клетками. Эти результаты продемонстрировали полезность метода культивирования ex vivo и визуализации в реальном времени.

Образец цитирования: Tsao C-K, Ku H-Y, Lee Y-M, Huang Y-F, Sun YH (2016) Долгосрочная культура Ex Vivo и визуализация в реальном времени Drosophila Larval Imaginal Discs. PLoS ONE 11 (9): e0163744.https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744

Редактор: Андреас Бергманн, Медицинская школа Массачусетского университета, США

Поступила: 6 июня 2016 г .; Принята к печати: 13 сентября 2016 г .; Опубликован: 29 сентября 2016 г.

Авторские права: © 2016 Tsao et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и его файлах с вспомогательной информацией.

Финансирование: Это исследование было поддержано грантами YHS (NSC 101-2321-B-001-004, NSC 100-2321-B-001-012, NSC 102-2321-B-001-002, MOST 103 -2311-B-001-035 -MY3) от Национального научного совета и Министерства науки и технологий Китайской Республики (https://www.most.gov.tw/en/public). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Introduction

Имагинальные диски личинок Drosophila были популярными экспериментальными объектами для изучения широкого спектра биологических явлений, включая пролиферацию, дифференцировку, апоптоз, конкуренцию, изменение формы, межклеточную передачу сигналов и формирование границ компартментов. Эти диски возникают в результате инвагинации эмбрионального эпителия и становятся уплощенными, образуя диски, состоящие из двух эпителиальных слоев, а именно периподиального эпителия (PE) и собственно диска (DP).Клетки имагинального диска пролиферируют через личиночные стадии и начинают дифференцироваться в конце личиночной стадии и развиваются в большинство структур взрослого тела во время куколочного периода. Благодаря плоской и простой двухслойной структуре их легко наблюдать. Однако визуализация дисков в реальном времени затруднена из-за их расположения глубоко внутри тела личинки. Хотя можно получить изображения живых личинок и куколок [1–5], разрешение и временное окно для наблюдений ограничены. Ex vivo Культивирование дисков проводится с 1960-х годов [6, 7].Кукольный диск можно культивировать до 96 часов [8], а поздние личиночные диски можно вызвать эвагинированием, чтобы имитировать событие в развитии куколки [9]. Однако условия длительного культивирования ex vivo , которые обеспечивают нормальное развитие и клеточное поведение имагинальных дисков личинок до эвагинации, когда диск является относительно плоским и может быть изучен как двумерная система, не были достигнуты удовлетворительно.

Наиболее сложной проблемой является поиск питательной среды, которая будет поддерживать рост и развитие имагинальных дисков в течение длительного периода.Среды с определенным химическим составом были разработаны для имитации состава гемолимфы личинок [7, 10–12]. Используя клетки, полученные из имагинальных дисков, для тестирования условий культивирования, было обнаружено, что добавление инсулина, экдистерона (20-гидроксиэкдизон, 20HE), экстракта мух и фетальной бычьей сыворотки (FBS) улучшало выживаемость и пролиферацию клеток [11, 13] . В последующих работах по культуре дисков варьировали концентрации этих компонентов [14–20] (обобщенные в таблице S1). Было получено только до 5-8 часов культивирования [18, 19], хотя предкуколочный диск крыльев культивировали в течение 10 часов для изучения дислокации диска [16].Крыловые диски поздней третьей возрастной стадии культивировали в течение 24 часов, что позволило дифференцироваться нейронам [21]. Однако это условие не использовалось другими и не сработало для диска глаз-усик в наших руках. Мы сообщаем, что мы определили состояние культивирования, которое может поддерживать нормальную дифференцировку клеток, морфогенез и миграцию имагинальных дисков в течение 18 часов.

Результаты и обсуждения

Многолетняя культура глазно-антеннальных и крыльевых дисков

Основываясь на влиянии на дифференцировку, миграцию и пролиферацию клеток, а не на рост, мы нашли рецепт культуральной среды (таблица S1), которая может поддерживать нормальное развитие диска в течение как минимум 18 часов.Мы культивировали глазно-антеннальный диск в начале третьего возраста (84 ч AEL; S1, рис.) И середины третьего возраста (96 ч AEL; рис. 1) в среде без визуализации для различной длины, а затем окрашивали на нейрональные маркеры и маркеры глии. С точки зрения количества рядов кластеров фоторецепторов (омматидий) и количества базальной глии сетчатки (RBG), которая мигрировала из оптического стебля в глазной диск, а также количества оборачивающей глии (WG) как индикатора дифференцировки глии, Диск ex vivo развивался сравнимо с дисками in vivo через 6, 12 и 18 часов, за исключением того, что количество рядов омматидий было немного уменьшено через 18 часов (Рис. 1A – 1C).Развитие замедлилось через 24 и 36 часов (S1A и S1B, фиг.). Прогрессирование морфогенетической борозды (MF) указывает на то, что нормальный клеточный морфогенез может поддерживаться. В 36-часовом культивированном диске ex vivo кластеры зрелых фоторецепторов были смежными с MF (не показано), что позволяет предположить, что прогрессирование MF остановилось. В течение первых 12 часов культивирования ряд омматидий увеличивался со скоростью 1,8 часа на ряд (рис. 1 и рис. S1), в соответствии с предыдущими отчетами от 1,5 часов [22, 23] до 2 часов [24, 25] на каждый ряд. ряд.Размер диска, культивируемого ex vivo, был сопоставим с размером диска in vivo через 6 часов, но после этого не увеличивался (фиг. 1D, S1C, S1F и S1I, фиг.). Количество клеток S-фазы (BrdU ⁺ ) в первой митотической волне (FMW) и второй митотической волне (SMW) в культивированном ex vivo глазном диске было сравнимо с in vivo диском через 6 и 12 часов, но значительно снизилось. через 18 часов (рис. 1E и 1F). Количество митотических (ph4 ⁺ ) клеток во всем диске было относительно нормальным через 6 часов, но значительно уменьшилось через 12 и 18 часов (рис. 1G).Мы также создали нейтральные клоны, помеченные ядерным GFP на 72-часовом AEL, и вырезали диски на 96-часовом AEL для культивирования. Среднее количество клеток на клон в культивированном диске ex vivo сравнимо с диском in vivo до 12 часов в культуре и становится значительно сниженным через 18 часов в культуре (114 часов AEL) (рис. 1H). Плотность клеток в глазном диске, культивированном ex vivo, не отличалась существенно от in vivo на диске в течение 12 часов, но снижалась через 18 часов (S2, фиг.). Плотность клеток in ex vivo и in vivo на антенном диске существенно не различалась в течение 18 часов (S2, фиг.).Культивированный ex vivo диск глаз-антенна показал увеличение количества положительных по каспазе 3 клеток через 12 и 18 часов (S2 фиг.), Что, вероятно, компенсировало увеличение числа клеток за счет делений клеток.

Рис. 1. Улучшенная среда для длительного культивирования ex vivo диска глаз-антенна.

(AD) Средняя треть возрастная стадия (96-часовой AEL) MZ97> RFP Глазно-антеннальные диски культивировали ex vivo в течение 6, 12 и 18 часов (102, 108 и 114 часов AEL, соответственно), и по сравнению с дисками, вырезанными от личинки ( in vivo ) в эти моменты времени.Диски культивировали в среде 1Х инсулина (данное исследование) и среде Handke et al. (2014) и Legoff et al. (2013) (см. Таблицу S1) соответственно для сравнения. (A) Количество рядов омматидиев, отмеченных анти-HRP. (B) Количество базальной глии сетчатки (отмеченной анти-Репо). (C) Количество обертываний глии, обозначенное MZ97> RFP . (D) Размер диска глаз-антенна. (EG) Средняя треть возрастная стадия (96-часовой AEL) w ¹¹¹⁸ глазно-антеннальные диски культивировали ex vivo в течение 6, 12 и 18 часов (102, 108 и 114 часов AEL, соответственно), и по сравнению с дисками, вырезанными от личинки ( in vivo ) в эти моменты времени.(E) Количество клеток BrdU ⁺ в первой митотической волне (FMW). (F) Количество клеток BrdU ⁺ во второй митотической волне (SMW). (G) Количество клеток фосфор-гистон 3 (ph4 ⁺ ) во всем диске. Для всех экспериментов N = 10. (H) Нейтральные клоны, помеченные ядерным GFP, индуцировали при 72-часовом AEL, а диски вырезали при 96-часовом AEL и культивировали в течение 6, 12 и 18 часов (102, 108 и 114 часов AEL соответственно). ) и сравнивали с клонами на только что рассеченном диске.Сравнивали количество клеток в каждом клоне. N = 20.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g001

В крыловом диске, культивированном с начала третьего возраста (84 ч AEL), количество клеток в S-фазе снижалось через 12 часов и неуклонно снижалось. через 24 и 36 часов (рис. 2А). Количество митотических клеток значительно снизилось через 12 часов и оставалось низким через 24 и 36 часов (рис. 2B). Живое изображение культивируемого крылового диска ex vivo в течение 16 часов показало значительное снижение митотических событий через 7 часов (рис. 2C).Через 12 часов митозов больше нет. Размер крылового диска показал очень небольшой рост в течение 36 часов периода культивирования ex vivo (рис. 2D). Кроме того, культивируемый крыловой диск ex vivo начинает демонстрировать морфологические изменения через 48 часов в культуре (данные не показаны), вероятно, отражая преждевременный выворот диска. Плотность клеток существенно не различается между in vivo и ex vivo крыльевыми дисками в течение по крайней мере 24 часов (S3E фиг.). Положительные по каспазе 3 клетки на диске ex vivo были сравнимы с диском in vivo в течение 24 часов и были выше только через 36 часов (S3D, фиг.).

Рис. 2. Длительная культура ex vivo крылового диска.

Диск крыльев, вырезанный из 84-часовой личинки AEL (середина L3), культивировали ex vivo в течение 12, 24 и 36 часов, соответственно, и сравнивали с диском, непосредственно вырезанным из личинки ( in vivo, ) в соответствующие моменты времени. . Диски окрашивали на включение BrdU и DAPI. (A) Количество клеток BrdU ⁺ постепенно снижалось на диске, культивируемом ex vivo. N = 10. Процент ячеек S фазы согласуется с предыдущим отчетом [46].(B) Количество митотических клеток (ph4 ⁺ ) клеток, поддерживаемое на низком уровне в течение 36-часового периода культивирования. N = 10. (C) Число клеточных делений в течение каждого часа отслеживают в течение 16-часового периода культивирования крылового диска His2Av-GFP. N = 6 дисков. Общее количество клеток = 2389. (D) Размер диска (площадь) показал лишь небольшой рост в течение 36-часового периода культивирования.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g002

Таким образом, наша новая среда может поддерживать дифференцировку фоторецепторов и глии в глазном диске в течение 18 часов, устойчивую пролиферацию клеток в течение 7 часов в дисках крыльев и 12 часов. hr в диске глаз-антенна, но не поддерживает рост дисков крыльев и глаз-антенн.

Основное отличие нашего рецепта — высокая концентрация инсулина (1250 мкг / мл). Мы проверили, оптимальна ли концентрация инсулина (S1 рис.). Без инсулина фоторецепторы, глия и размер диска очень незначительно увеличиваются даже в первые 12 часов. При разных концентрациях инсулина (S1A – S1C, рис.) 1x и 2x поддерживали наибольшую дифференциацию с точки зрения количества фоторецепторов и глии, но не влияли на размер диска. Инсулин, вероятно, имитирует активность эндогенного фактора, возможно, инсулиноподобных пептидов.Интересно, что человеческий инсулин был немного лучше, чем бычий инсулин, в стимулировании дифференцировки фоторецепторов (S1J и S1K, фиг.). Мы также обнаружили, что добавление экстракта личинки (S1D – S1F Fig) или экстракта взрослых особей (не показан) не оказало значительного влияния на дифференцировку и рост дисков. Добавление гормона линьки 20HE в различных концентрациях уменьшало развитие (S1G – S1I, рис.). Добавление трегалозы в кровь насекомых (60 мкг / мл) на уровне, сопоставимом с концентрацией гемолимфы, не принесло пользы (S1L и S1M фиг.).

Мы сравнили наш рецепт с двумя другими недавними отчетами о методе культивирования (таблица S1, рис. 1A – 1D). Диски, выращенные на нашей среде, показали лучшее развитие, чем диски, выращенные на среде Legoff et al. (2013) даже при 6 часах культивирования и лучше, чем те, что выращивались на среде Handke et al., (2014) через 12 часов. Различия еще больше усиливаются через 18 часов. Все три носителя не поддерживают увеличение размера диска.

Долгосрочная визуализация диска крыла в реальном времени

Крыловой диск личинок среднего второго (среднего L2) возраста культивировали и наблюдали в течение 16.5 часов (при 25 ° C, соответствует началу-середине третьего возраста; S1 Movie). Для заделки дисков использовали 2% агарозу, охлажденную до комнатной температуры [16]. Использовали низкотемпературную агарозу. Это было эффективно для предотвращения смещения диска из фокальной плоскости во время визуализации и минимизации повреждения диска. Sqh-mCherry показал актомиозиновый кабель, сформированный на границе DV (рис. 3A, стрелка) примерно через 16,5 часов, что соответствует раннему L3. Время согласуется с предыдущими сообщениями о том, что образование актомиозинового кабеля на границе DV происходит на ранней стадии L3 [26].Этот результат показывает, что культивируемый диск ex vivo может развиваться от середины L2 до раннего L3 за время, сравнимое с развитием in vivo . Это также показывает, что импульс гормона линьки 20HE при линьке личинки не требуется для развития крыльевого диска от L2 до L3.

Рис. 3. Клеточная пролиферация и формирование границ DV в культивируемых крыльевых дисках.

(A) Кадры из фильма S1 середины L2 крылового диска, культивированного ex vivo при 25 ° C в течение 16,5 часов (соответствует раннему-середине L3) по сравнению с in vivo диском в том же возрасте. Sqh -mCherry — это спагетти-сквош (Sqh), немышечная легкая цепь миозина, слитая с mCherry [47]. Sqh-mCherry (зеленый) показал кабель актомиозина на границе DV (стрелка) через 16,5 часа. ap-Gal4 управляемый ядерный GFP ( ap> GFP . nls ) (белый) пометил спинной отсек. Интенсивность выражения со временем постепенно увеличивалась. N = 4 диска для ex vivo , N = 6 для in vivo . Интенсивность Sqh-mCherry в дорсальном (домен, экспрессирующий ap-GAL4) и вентральном домене существенно не различаются (соотношение = 1.13 ± 0,12, N = 6). Отсутствие ядерного сигнала в левой части изображения связано с кривизной диска. (B-D) Кадры и анализ, основанный на фильме S2 Mid-L3 His2Av-GFP крылового диска, культивированного в течение 16 часов. N = 4 диска. (B) Срезы XZ из фильма S2 с апикальной поверхностью наверху. Делящиеся ядра отмечены красной звездочкой. (C) Ориентация каждого клеточного деления в течение 7 часов отмечена линией, соединяющей две дочерние клетки. (D) Ориентация делений клеток (на основе C) показала смещение для делений вдоль оси DV и против оси AP.(E, F) Кадры и анализ на основе S3 Movie. Диск глаз-антенна раннего L3 ubi> Fucci культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 14,5 часов. Флуоресцентный маркер GFP-E2F _11–230 (зеленый) маркирует фазы G2, M и G1, а mRFP1-CycB _1–266 (пурпурный) маркирует фазы S, G2 и M. Их комбинация позволяет четко различать фазы G1 (только GFP; зеленый), S (только RFP; пурпурный) и G2 (GFP и RFP; белый). (E) Клетка подвергается клеточному делению, переходя от G2 (GFP и RFP) к двум клеткам G1 (GFP).(F) Сравниваются доли различных фаз клеточного цикла в начале и в конце периода культивирования. N = 3 диска. На этом и последующих рисунках масштабная линейка составляет 30 мкм, за исключением (D, E) 10 мкм. Этот и последующие анализы, основанные на живом изображении, основаны как минимум на трех независимых фильмах. Результаты были похожи.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g003

Деления клеток культивируемого крылового диска анализировали с помощью His2Av-GFP, который маркирует хромосомы.Диск крыла середины L3 культивировали и наблюдали в течение 7 часов (S2 Movie). В течение этого периода плотность клеток в области изображения существенно не увеличилась. Из 573 клеток в момент времени 0 в отображаемой области всего за 7-часовой период было подсчитано 120 клеточных делений. Ориентация клеточных делений была отмечена и показала предпочтение дистально-проксимальной (DV) оси (рис. 3B и 3C), что согласуется с предыдущим сообщением [27, 28]. Деление клеток относительно редко в пограничной области DV (рис. 3B), что согласуется с предыдущим отчетом [29].Делящиеся ядра поднялись от эпителия к поверхности, разделились и затем снова погрузились в эпителий (Рис. 3D), что согласуется с предыдущим сообщением [30].

Деления клеток также контролировались Fly-Fucci [31]. Флуоресцентный маркер GFP-E2F _11–230 маркирует фазы G2, M и G1, а mRFP1-CycB _1–266 маркирует фазы S, G2 и M. Их комбинация позволяет четко различать фазы G1 (только GFP), S (только RFP) и G2 / M (GFP и RFP). Для ранней стадии L3 ubi> Fucci антенный диск, контролируемый для 14.Через 5 часов (S3 Movie) количество клеток увеличилось с 444 до 492. Наблюдалось 39 митотических событий (ядра G2 / M, разделенные для генерации двух ядер G1; рис. 3E), что составляет большую часть из 48 новых клеток. Можно наблюдать пропорцию клеток в разных фазах клеточного цикла, и не было обнаружено различий между началом и концом 7-часового периода (рис. 3F).

Долгосрочные живые изображения глазно-усикового диска.

Глазной диск mid-L3 elav> h3B-RFP отслеживался в течение 15,75 часа (фильм S4).В течение этого периода количество омматидиевых кластеров из 8 клеток увеличилось с 65 до 226, а количество рядов омматидиев увеличивалось со скоростью 3,15 ч / ряд (рис. 4), что медленнее, чем 1,8 ч / ряд, рассчитанное из диск недавно рассечен в разные моменты времени (рис. 1). Вероятно, это связано с воздействием длительного лазерного воздействия. Можно увидеть, как ядро ​​поднимается к апикальной поверхности, чтобы делиться, а затем опускается базально, что согласуется с предыдущим сообщением [32]. Такие подразделения можно увидеть на протяжении 15 лет.75 часов культивирования и визуализации. Прогрессирование MF можно увидеть на среднем диске Sqh-GFP глаз-антенна L3, культивированном в течение 14,7 ч (S5 Movie).

Рис. 4. Развитие омматидий в культивируемом глазно-усиковом диске.

(A, B) Кадры взяты из фильма S4. Глазно-антеннальный диск mid-L3 elav> h3B-RFP культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 15,75 часа. Фоторецепторные нейроны RFP ⁺ (красный) появляются позади морфогенетической борозды (MF) и образуют омматидиальные кластеры из 8 клеток.В начале 6 рядов омматидиев (А) и 11 рядов в конце (В). N = 3 диска. Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g004

Группа глии (базальная глия сетчатки, RBG), экспрессирующая маркер панглии Repo, мигрирует из оптического стержня в глазной диск [33 , 34]. Передняя большая часть их распределения — это 3-5 рядов клеток позади прогрессирующей вперед морфогенетической борозды (MF). Основываясь на морфологии и молекулярных маркерах, существует три основных типа RBG, а именно ковровая глия (CG), поверхностная глия (SG) и оборачивающая глия (WG) [35].Репо -Запрос предложений . nls позволял визуализировать поведение RBG в реальном времени (фильм S6). За период 11,5 часов количество ядер Repo ⁺ в глазном диске середины L3 увеличилось со 179 (рис. 5A; отмечено синим) до 207 (рис. 5B; новые ядра Repo ⁺ отмечены белым). Наблюдалось 39 делений клеток (фиг. 5C, стрелка указывает на делящиеся клетки в C ’), что составляет 92% из 42 новых RBG. Остальные 8% связаны с миграцией из оптического стебля. Две дочерние клетки события деления связаны линией (рис. 5C) и могут разойтись на большое расстояние от исходного места деления. repo> Fucci позволил детектировать глиальные клетки, претерпевающие полный клеточный цикл (фиг. 5D, стрелка), а также клетки, которые претерпевают эндорепликацию (фиг. 5D, стрелки).

Рис. 5. Пролиферация и миграция базальной глии сетчатки в культивируемом глазном диске.

Данные взяты из S6 Movie. Репо середины L3 — RFP . nls. глазно-антеннальный диск культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 11,5 часов. Nuclear RFP (зеленый) отмечает ядра RBG. Ядра Repo ⁺ , присутствующие в момент времени 0 (A), искусственно помечены синим цветом.Новые ядра Repo ⁺ были отмечены белым цветом (B). (C, C ’) Показано деление на две ячейки (стрелки). Две дочерние клетки события деления связаны линией. Сайты их подразделений отмечены синими точками. (D) В глазном диске repo> Fucci ex vivo клетка может пройти полный клеточный цикл (стрелка показывает переход от красного (фаза S) к отсутствию сигнала (фаза митоза) к двум дочерним клеткам зеленого цвета (фаза G1)) . Клетка может подвергнуться эндорепликации (стрелки показывают переход от желтого (фаза G2) к зеленому (фаза G1) без митоза).(E) Дорожка каждого ядра Repo ⁺ была записана и закодирована цветом, причем синий цвет представляет начало, а красный — конец движения. Два больших ядра Repo ⁺ — это ковровая глия. Они не подвергаются обширному движению. (F) Следы миграции представлены как смещения от их происхождения. (F ’) Представлены дорожки нескольких ячеек. N = 3. Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g005

Дорожка каждого ядра Repo ⁺ была записана и закодирована цветом, чтобы показать начало и конец движения (рис. 5E).Следы также представлены как смещения от их исходной точки (рис. 5F и 5F ’). Следы показали, что большинство RBG мигрировали к передней части глазного диска, но некоторые мигрировали назад, что свидетельствует о двух разных популяциях RBG с различным миграционным поведением.

C527-Gal4 использовали в качестве маркера SG (Silies et al., 2007). A C527> GFP . nls Глазной диск mid-L3 культивировали и отображали в течение 11,5 часов (фильм S8). Вначале было 152 ядра C527 ⁺ (рис. 6А).110 из них не делились (синие точки на фиг. 6A и 6B). 23 разделены, и обе дочерние клетки являются C527 ⁺ (фиолетовые точки на фиг. 6B). 9 разделенных, но только одна дочерняя ячейка — это C527 ⁺ (белые точки на фиг. 6B). В общей сложности 32/152 (21,0%) подверглись делению, что аналогично 21,8% (39/179 на рис. 5) для клеток Repo ⁺ . Таким образом, глия C527 ⁺ , вероятно, является причиной всех пролиферирующих RBG. 14 ядер C527 ⁺ (желтые точки на фиг. 6B) исчезли в течение этого периода, вероятно, из-за дифференцировки в другой тип клеток и потери экспрессии маркера или из-за гибели клеток.Возникновение митотических событий наносили на график каждые 10 минут (рис. 6H). Деления были разбросаны, но только одно деление произошло через 10 часов, что позволяет предположить, что деление может не поддерживаться нормально после 10 часов в культуре. График миграции смещения показал, что ядра C527 ⁺ в основном мигрировали вперед (Фиг.6F и 6F ’).

Рис. 6. Пролиферация и миграция поверхностной глии и оборачивающей глии в культивированном глазном диске.

(A, B, F) Глазной диск C527> h3B-RFP mid-L3 культивировали и визуализировали в течение 11.5 часов (S7 Movie). (A) 152 ядра C527 ⁺ наблюдались вначале. (B) 183 ядра C527 ⁺ наблюдались в конце 11,5 часа. Из начальных 152 ячеек 110 не делились (синие точки на A и B), 23 разделились, и обе дочерние клетки были C527 ⁺ (фиолетовые точки), и 9 разделены, но только одна дочерняя ячейка C527 ⁺ (белые точек). 14 ядер C527 ⁺ (желтые точки на A) исчезли за этот период. (C, D) Глазно-антеннальный диск середины L3 MZ97> h3B-RFP культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 20 часов (S8 Movie).(C) Ядра MZ97 ⁺ , присутствующие в момент времени 0, отмечены синим цветом. (D) Новые ядра MZ97 ⁺ отмечены белым цветом. В ядрах MZ97 ⁺ деления не наблюдалось. (E) MZ97> Fucci (фильм S9) показал, что передние клетки MZ97 ⁺ (стрелка) могут переходить из фазы S (пурпурный) в G1 (зеленый), не подвергаясь митозу (пурпурный плюс зеленый). Только один раунд эндорепликации наблюдался для WG за период наблюдения. (F, G) Треки миграции ядер C527 ⁺ (F) и MZ97 ⁺ (G) представлены как смещения от их исходной точки, причем синий цвет представляет начало, а красный — конец движения.(F ’, G’) Изолированная дорожка нескольких клеток показана в качестве примеров различного поведения. (H) Митотическое событие каждые 10 минут в глазном диске C527> h3B-RFP mid-L3, культивированном в течение 11,5 часов (S7 Movie). Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g006

Мониторинг WG осуществлял MZ97> h3B-RFP (S7 Movie). За период 20 часов, ядра MZ97 ⁺ в среднем L3 глазном диске увеличились с 86 до 181. 47 новых ядер MZ97 ⁺ отмечены белым цветом во время 8-часовой визуализации в реальном времени (Рис. 6C и 6D).Однако в ядрах MZ97 ⁺ деления не наблюдалось. Это согласуется с предыдущими сообщениями о том, что клетки MZ97 ⁺ являются постмитотическими, основываясь на обнаружении, что блокирование деления клеток в WG не снижает количество клеток RBG [35]. Получение изображений в реальном времени показало, что все новые ядра MZ97 ⁺ появляются в переднем фронте, а не мигрируют из оптического стебля. Это также согласуется с моделью последовательной дифференцировки, согласно которой WG дифференцируется от мигрирующих SG при контакте с аксоном фоторецепторов на переднем фронте [35].Наши живые изображения предоставили прямые доказательства того, что клетки MZ97 ⁺ дифференцируют in situ от клеток Repo ⁺ на переднем фронте. Интересно, что MZ97> Fucci (рис. 6E и S9 Movie) показали, что передние клетки MZ97 ⁺ могут переходить из фазы S (пурпурный) в G1 (зеленый), не подвергаясь митозу (пурпурный плюс зеленый), предполагая, что клетки MZ97 могут подвергаются эндорепликации, что, вероятно, объясняет эндорепликацию, наблюдаемую в репо > Fucci (рис. 5D).Следы миграции показали, что большинство ядер MZ97 ⁺ мигрируют к задней части (рис. 6G и 6G ’).

CG — это две гигантские глины с расширенной мембраной, покрывающей всю область RBG. C135-Gal4 , CG-специфический Gal4, управляемый moesin-GFP ( C135> moesin-GFP ), продемонстрировал расширение мембраны с динамическими выступами в передней передней части (фильм S10). Передний фронт CG мембраны увеличился на 21,7 мкм в течение 7,5 часов визуализации.

Имея возможность длительного культивирования ex vivo , можно выборочно манипулировать конкретными клетками. Например, мы специально экспрессировали флуоресцентный белок KAEDE (Ando et al., 2002; Mizuno et al., 2003; Chen et al., 2012) в CG с использованием драйвера C135-Gal4 . Затем мы выборочно пометили один из двух CG путем УФ-преобразования KAEDE из зеленого в красный (рис. 7). Преобразованный сигнал почти мгновенно распространяется на всю ячейку. Это специфичное для клетки мечение позволило визуализировать размер мембраны каждого из двух CG.Он не показал почти никакого перекрытия между двумя CG, что свидетельствует о мозаичном механизме или механизме отталкивания между двумя клетками.

Рис. 7. Выборочная маркировка глии одиночного ковра.

(A-C) Флуоресцентный белок KAEDE экспрессировался в ковровой глии с помощью драйвера C135-Gal4 . Один из двух CG селективно освещался лазером с длиной волны 514 нм в области, выделенной рамкой. KAEDE был фотопреобразован из зеленого в красный, и сигнал очень быстро распространился по всей ячейке. (D) Зеленый сигнал показал почти полное преобразование в красный и медленно восстанавливался из-за синтеза нового белка.(E) Красный сигнал медленно затухал, вероятно, из-за деградации белка. Последующие усиления при более низкой мощности лазера производились каждые 4 часа для поддержания красного сигнала. N = 3. Масштабная линейка 50 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.g007

Выводы

Таким образом, наш метод позволяет долгосрочное культивирование ex vivo и живую визуализацию имагинальных дисков личинок. Мы протестировали крылья, антенны и глазные диски и продемонстрировали, что, хотя условия культивирования не поддерживают рост диска и поддерживают только деление клеток в течение 7–12 часов, культивируемые диски проходят нормальный процесс развития, такой как пролиферация клеток, дифференцировка, миграция. и мембранная динамика до 18 часов.Этот метод давал возможность непосредственно наблюдать временную последовательность биологических событий, что намного лучше, чем выведение последовательных событий путем объединения нескольких снимков в разные моменты времени и часто из разных образцов. Он позволяет селективно маркировать или манипулировать конкретными клетками с лазерной точностью, заменяя или дополняя генетическую маркировку. Мы использовали активированный лазером KAEDE, чтобы специально пометить одну глию ковра, и наблюдали за всем ее расширением мембраны (рис. 6).Мы также можем использовать лазер для специфического разрушения актомиозиновой сети с помощью метода лазерной инактивации с помощью хромофора (CALI; [36]) в диске, чтобы исследовать физическое напряжение между клетками (HYK и YHS, представлены). Он также позволяет легко тестировать химические вещества, добавляя их непосредственно в культуральную среду, поэтому его можно использовать в качестве платформы для скрининга наркотиков. Хотя мы сосредоточились на имагинальных дисках, это состояние также может быть подходящим для других тканей личинок.

Наши живые изображения поведения RBG в глазном диске предоставили прямое доказательство того, что MZ97 ⁺ WG отличается от существующих клеток Repo ⁺ и, возможно, от C527 ⁺ SG.Эти результаты согласуются с моделью последовательной дифференциации [35]. Наши результаты также показали, что SG и WG имеют различное миграционное поведение и предположили, что WG подвергается эндорепликации. Мы также показали, что две гигантские ковровые глиальные мембраны не перекрываются, что указывает на механизм отталкивания двух клеток.

Материалы и методы

Мухи

Используемые ложи: sqh ^AX3 Sqh-GFP [37] (предоставлено Jui-Chou Hsu), Sqh-mCherry [38] (предоставлено Yu-Chiun Wang), UAS-h3B-RFP [39], UAS-KAEDE (Chen et al., 2012) (предоставлено Ann-Shyn Chiang). Репо -Запрос предложений . nls [40], ap ^md544 -Gal4 [41], His2Av-EGFP [42], UAS-Fucci и ubi-Fucci ( ubi-GFP-E2F _11-230 ubi-mRFP1-NLS-CycB _1-266 ) [31], UAS-Moesin-GFP был получен из Центра генетических ресурсов дрозофилы. hs-FLP ¹²² , Ay-Gal4 UAS-GFP , C135-Gal4 , elav-Gal4 , C527-Gal4 , MZ97-Gal4 и UAS-GFP . nls были получены из Bloomington Drosophila Stock Center.

Питательная среда

В среду Schneider’s Drosophila (Thermo 21720–024) добавляли 2% FBS (Sigma N4765), 0,5% пенициллин-стрептомицин (GIBCO0759), 0,08% экстракт мух и 1,25 мг / мл инсулина (Sigma I9278). Приготовленную питательную среду использовать в течение месяца.

Экстракт мухи

Около 0,35 г личинки или взрослой особи (около 300 каждой) замораживали в 1,5 мл Eppendorf при -80 ° C в течение не менее 45 минут и измельчали ​​в двух частях.5 мл среды Schneider’s Drosophila с одноразовым гомогенизатором микротканей (Thomas No. 1215D61). Гомогенат центрифугировали при 1500 мкг (KUBOTA 1720, ротор RA-48J) при 4 ° C в течение 30 минут. Супернатант сливали в свежую пробирку Эппендорфа и инкубировали при 60 ° C в течение 10 минут для инактивации протеазы, снова центрифугировали при 1500 xg при 4 ° C в течение 60 минут. Супернатант стерилизовали через фильтр 0,22 мкм. Экстракт мух (0,14 г / мл) хранят при 4 ° C и используют в течение недели.

Агароза легкоплавкая

0.75% низкотемпературная агароза (Agarose II, AMRESCO 0815-25G) в 1xPBS (10X PBS: 80 г NaCl, 14,4 г Na ₂ HPO ₄ , 2,4 г KH ₂ PO ₄ , 2 г KCl на 1 л MilliQ H _{2 (} O, довести pH до 7,0) расплавляли с помощью микроволн и выдерживали при 37 ° C. Его следует использовать в течение месяца. Каждый раз после использования агарозу кипятили, чтобы избежать контаминации.

Рассечение дисков

Все оборудование (пинцет, пипетка, покровное стекло и т. Д.) Стерилизовали 70% этанолом.Диск одного глаза с прикрепленным к нему полушарием мозга и крючком для рта осторожно рассекали в культуральной среде. Крыловой диск отделяли от эпидермиса личинок.

Культура и визуализация в реальном времени

Компоненты культуральной камеры (PECON, POC-R2 Cell Cultivation System) вымачивали в течение не менее 12 часов в 70% этаноле и собирали на покровном стекле 0,17 мм на акцепторе предметного столика. Крышка камеры была снята, и образец диска был помещен на покровное стекло с помощью пипетки.Ориентацию диска регулировали щипцами так, чтобы диск лежал на слайде ровно. Большую часть среды удаляли и к образцу добавляли 5–6 мкл 0,75% агарозы с низким гелеобразованием (37 ° C). Расплавленный гель добавляли вертикально, чтобы глазной диск оставался на дне геля. Через 5 минут для затвердевания агарозы в камеру медленно добавляли 1 мл культуральной среды при 25 ° C. Затем камеру загружали в инвертированный конфокальный микроскоп Zeiss LSM 710 в инкубаторе, оборудованном контроллером CTI, при 25 ° C.

Изображение

Покадровые изображения ex vivo были получены с помощью Zeiss LSM 710 с детектором GaAsp или конфокального лазерного сканирующего микроскопа 510 META-NLO, оборудованного культуральной камерой, поддерживаемой при 25 ° C и постоянной поддержкой влажного воздуха (25 ° C). . Объективы C-Apochromat 40x / 1,2 Вт Korr или LD C-Apochromat 40x / 1,1 Вт использовались для большей части изображений. Изображения Z-стека были получены каждые 4, 10 или 15 минут, как указано в видеороликах.Использовали 30–60 срезов на стопку в зависимости от типа флуоресцентных белков (ядро / мембрана) из разных образцов. Оптические срезы были установлены на 1,2 мкм с оптическим интервалом менее 1 мкм. Размер глазно-антеннального диска и изменение роста регистрировали с помощью объектива Plan-Apochromat 20x / 0,8. 45 срезов укладывали стопкой под оптическую секцию 1,4 мкм с оптическим интервалом 0,8 мкм. Время отображается в виде часов: минут: секунд относительно начала промежутка времени.

Индукционный клон

Клоны индуцировали при 72-часовом AEL в течение 7 минут теплового шока и анализировали при 96-часовом AEL.

Фотоконверсия KAEDE

Зеленый KAEDE возбуждали лазером с длиной волны 514 нм и контролировали эмиссию красного цвета с длиной волны 543 нм. Первоначальное фотопреобразование составляло 3% мощности лазера 25 мВт для 80 сканирований. Каждое сканирование занимает 1,4 секунды. Поскольку фото-конверсия происходит из-за расщепления пептида [43], она необратима и стабильна. Красный сигнал медленно затухает, вероятно, из-за деградации белка. Зеленый сигнал показал почти полное преобразование в красный и медленно восстанавливался из-за синтеза нового белка.Последующие усиления были уменьшены до 1% от 25 мВт лазера для 40 сканирований по 1,4 секунды каждое, в общей сложности 1 мин, каждые 4 часа для поддержания красного сигнала.

Иммуноокрашивание

Диски личинок вскрывали, фиксировали и окрашивали в соответствии с протоколом, описанным ранее [44]. Первичные антитела были: мышиные анти-Cut (1: 200), мышиные анти-Repo (1: 100), крысиные анти-Elav (1: 200), крысиные анти-E-кадгерин (1:25) из гибридомы исследований развития. Банк (DSHB, Университет Айовы). Антитело против расщепленной каспазы 3 (CC3) [45] получено от Cell Signaling Technology 9661S.Флуоресцентно-конъюгированные вторичные антитела, включая анти-HRP (1: 300), были получены от Jackson ImmunoResearch. Процедуры визуализации были получены с помощью конфокального микроскопа LSM 510 Meta или LSM 780 (Zeiss).

Вспомогательная информация

S1 Таблица. Сравнение средних составов.

Для сравнения мы стандартизировали составы различных сред для дисковых культур. FBS, фетальная бычья сыворотка; FCS, фетальная телячья сыворотка. Сыворотка инактивирована нагреванием. Стандартная единица приема антибиотиков — 10 Ед / мл пенициллина и 10 мкг / мл стрептомицина.Стандартный экстракт мух или личинок составляет 0,14 г / мл в среде Шнайдера. Мы обнаружили, что экстракт личинок и взрослых особей эквивалентны. Мы использовали рекомбинантный человеческий инсулин, тогда как бычий инсулин, очищенный из поджелудочной железы, использовали в других исследованиях [13, 15, 18, 20]. Источник остальных сообщений неизвестен. Мы не проверяли, имеет ли значение источник вида. Преобразование концентрации инсулина в Zartman et al (2013) составляет 2,5 Ед / мг. Экдизон — это 20-гидроксиэкдизон. # аналог ювенильного гормона и кондиционированная среда для жирового тела.§ 50 мкг / мл пенициллина, 50 мкг / мл стрептомицина, 100 мкг / мл неомицина.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s001

(DOCX)

S1 Рис. Оптимизация питательной среды.

Ранняя третья возрастная стадия (84 ч AEL) w ¹¹¹⁸ диски глаза-усики культивировали ex vivo в течение 12 часов, 24 часов и 36 часов (96, 108 и 120 часов AEL), соответственно, и по сравнению с дисками, свежеотрезанными от личинки ( in vivo ) в эти моменты времени.(A-C) Сравнивались разные концентрации инсулина. (D-F) Сравнивали среду с инсулином 1Х с добавлением экстракта личинки различной концентрации. (G-I) Сравнивали среду с инсулином 1X с добавлением 20HE различной концентрации. (J, K) Сравнивали инсулин человека или крупного рогатого скота. (L, M) Сравнивали среду инсулина 1X с добавлением трегалозы (60 мкг / мл). (A, D, G, J, L) Количество рядов омматидиев, отмеченных анти-HRP. (B, E, H) Количество базальной глии сетчатки (отмеченной анти-Репо).(C, F, I, K, M) размер диска глаз-антенна. Во всех экспериментах N = 20.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s002

(TIF)

S2 Рис. Плотность клеток и гибель клеток в культивированном ex vivo диске глаз-антенна.

Диск глаз-антенна на 96h AEL, окрашенный DAPI (синий). Две вставки (зеленая и красная, от антенны и глазного диска соответственно) увеличены как A ’и A”. (B-B «) Диск in vivo на 102h (B, +6), 108h (B’, +12) и 114h (B «, +18) AEL. (C-C «) Диск ex vivo при 102h (C, +6), 108h (C’, +12) и 114h (C «, +18) AEL.Диски окрашивали DAPI (синий) и анти-расщепленной каспазой 3 (CC3, красный). Плотность клеток в глазном диске (D) и антенном диске (D ’) in vivo и ex vivo наносили на график для 18-часового периода культивирования. (E) Количество клеток CC3 ⁺ в диске глаз-антенна in vivo и ex vivo наносили на график для 18-часового периода культивирования. Шкала составляет 30 мкм, за исключением A ’и A” (5 мкм).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s003

(TIF)

S3 Рис. Плотность клеток и гибель клеток в культивируемых ex vivo крыльевых дисках.

Крыловой диск на 84h AEL, окрашенный DAPI (синий). Вставки (зеленые) увеличены как A ’. (B-B «) Диск in vivo при 96-часовом (B, +6), 108-часовом (B’, +12) и 120-часовом (B «, +18) AEL. (C-C «) Диск ex vivo при 96-часовом (C, +6), 108-часовом (C’, +12) и 120-часовом (C «, +18) AEL. Диски окрашивали DAPI (синий) и антиактивированной каспазой 3 (CC3, красный). Плотность клеток в крыловом диске (D) in vivo и ex vivo наносили на график для 18-часового периода культивирования. (E) Количество клеток CC3 ⁺ в крыловом диске in vivo и ex vivo наносили на график для 18-часового периода культивирования.Шкала составляет 30 мкм, за исключением A ’(5 мкм).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s004

(TIF)

S1 Фильм. Формирование границ DV в культивируемом крыловом диске.

Диск крыла середины L2 с ассоциированной трахеей культивировали в течение 16,5 часов (примерно в начале-середине L3). Sqh-mCherry (зеленый) показал появление актомиозинового кабеля на границе DV (стрелка) примерно через 16 часов. ap-Gal4 управляемый ядерный GFP ( ap> GFP . nls ) (белый) пометил спинной отсек.Интенсивность выражения постепенно увеличивалась. Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s005

(AVI)

S3 Фильм. Деления клеток в культивированном диске усиков.

Глазно-антеннальный диск из ранних L3 ubi> Fucci культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 12 часов. Можно различать фазы клеточного цикла G1 (только GFP; зеленый), S (только RFP; пурпурный) и G2 (GFP и RFP; белый). Масштабная линейка 30 мкм.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0163744.s007

(AVI)

S5 Фильм. Развитие морфогенетической борозды в культивированном

Глазно-антеннальный диск из ранних L3 Sqh-GFP культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 14,5 часов. Sqh-GFP (зеленый) отмечает контур клетки. Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s009

(AVI)

S6 Фильм. Распространение и миграция RBG в культивированном глазном диске.

Mid-L3 repo-nRFP глазно-антеннальный диск культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 11,5 часов, RFP (зеленый) отмечает RBG. В то время как большинство ядер Repo ⁺ движутся к переднему краю, некоторые мигрируют назад. Два больших ядра — это ковровая глия. Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s010

(AVI)

S8 Фильм. Миграция глии MZ97

Mid-L3 MZ97> h3B-RFP глазно-антеннальный диск культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 20 часов.RFP (зеленый) обозначает WG. Обратите внимание, что новые ядра MZ97 ⁺ появляются спереди, а многие ядра движутся назад. Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s012

(AVI)

S9 Фильм. MZ97

Глазно-антеннальный диск середины L3 MZ97> Fucci культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 23 часов. Передние клетки MZ97 ⁺ могут переходить из фазы S (пурпурный) в G1 (зеленый), не подвергаясь митозу (пурпурный плюс зеленый).Масштабная линейка 30 мкм.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0163744.s013

(AVI)

S11 Фильм. Выборочная маркировка единственной ковровой глии.

Глазной диск mid-L3 C135> KAEDE культивировали и контролировали при 25 ° C в течение 17,75 часов. Фотопреобразование было вызвано лазером с длиной волны 405 нм. Сразу после двух минут лазерного сканирования для фотопреобразования красный сигнал виден на всей поверхности ковровой глии. Масштабная линейка составляет 50 мкм.

https: // doi.org / 10.1371 / journal.pone.0163744.s015

(AVI)

Благодарности

Мы благодарны Chun-lan Hsu и Yu-Chi Yang за приготовление корма для мух и поддержание их запасов, а также Su-Ping Lee и IMB Imaging Core за помощь в конфокальной микроскопии. Работа поддержана грантами Y.H.S. (NSC 101-2321-B-001–004, NSC 100-2321-B-001–012, NSC 102-2321-B-001–002, MOST 103-2311-B-001–035 -MY3) из Национального Научный совет и Министерство науки и технологий Китайской Республики.

Вклад авторов

1. Концептуализация: CKT HYK YML YHS.
2. Формальный анализ: CKT HYK.
3. Финансирование: YHS.
4. Исследование: CKT HYK YML YFH.
5. Методология: CKT HYK YML YFH YHS.
6. Администрация проекта: YHS.
7. Программное обеспечение: CKT HYK.
8. Надзор: YHS.
9. Подтверждение: CKT HYK.
10. Визуализация: CKT HYK.
11. Написание — оригинальная черновик: CKT HYK.
12. Написание — просмотр и редактирование: CKT HYK YHS.

Ссылки

1. 1. Bosveld F, Bonnet I, Guirao B, Tlili S, Wang ZM, Petitalot A и др. Механический контроль морфогенеза с помощью пути полярности жирных / липовых / четырехсуставных плоских клеток. Наука. 2012. 336 (6082): 724–7. WOS: 000303872300051. pmid: 22499807
2. 2.Ганнад-Резайе М., Ван Х, Мишра Б., Коллинз С., Хронис Н. Микрожидкостные чипы для визуализации клеточных реакций на нервное повреждение у личинок дрозофилы in vivo. Plos One. 2012; 7 (1). ARTN e29869 WOS: 000301570600007. pmid: 22291895
3. 3. Heemskerk I, Lecuit T, LeGoff L. Динамический клональный анализ, основанный на хронической визуализации in vivo, позволяет количественно оценить рост в дисках крыльев дрозофилы в различных масштабах. Разработка. 2014. 141 (11): 2339–48. Epub 2014/05/29. pmid: 24866118.
4. 4.Тейлор Дж., Адлер П.Н. Перестройка клеток и деление клеток во время морфогенеза на тканевом уровне эвагинирующих имагинальных дисков дрозофилы. Биология развития. 2008. 313 (2): 739–51. Epub 2007/12/18. pmid: 18082159; PubMed Central PMCID: PMC2258245.
5. 5. Уорд Р.Э., Рид П., Баширулла А., Д’Авино П.П., Туммель С.С. GFP у живых животных обнаруживает динамические реакции развития на экдизон во время метаморфоза дрозофилы. Биология развития. 2003. 256 (2): 389–402. pmid: 12679111
6. 6.Шнайде И. Гистология глазно-антенных дисков личинок и головных ганглиев дрозофилы, культивируемых in vitro. J Embryol Exp Morph. 1966; 15: 271– и. WOS: A19667861

   2. pmid: 5964277

7. 7. Шнайдер И. Дифференциация глазно-антенных дисков личинок дрозофилы in vitro. J Exp Zool. 1964; 156 (1): 91- и. WOS: A19644933B00006. pmid: 14189923
8. 8. Гиббс С.М., Трумэн Дж. В.. Оксид азота и циклический GMP регулируют формирование паттерна сетчатки в зрительной доле дрозофилы.Нейрон. 1998. 20 (1): 83–93. WOS: 000071719700011. pmid: 9459444
9. 9. Фристром Дж. У., Логан В. Р., Мерфи С. Требования к синтетическим и минимальным культурам для эвагинации имагинальной формы Drosophila-Melanogaster in-vitro. Биология развития. 1973; 33 (2): 441–56. WOS: A1973Q426100017. pmid: 4207978
10. 10. Дэвис К.Т., Ширн А. Инвитро-рост имагинальных дисков у Drosophila-Melanogaster. Наука. 1977; 196 (4288): 438–40. WOS: A1977DB68100026. pmid: 403606
11. 11.Wyss C. Экдистерон, инсулин и экстракт мухи, необходимые для пролиферации нормальных клеток дрозофилы в определенной среде. Exp Cell Res. 1982. 139 (2): 297–307. WOS: A1982NY47

    7. pmid: 6806111

12. 12. Шилдс G, Sang JH. Характеристики пяти типов клеток, возникающих при культивировании in vitro эмбрионального материала Drosophila melanogaster. J Embryol Exp Morphol. 1970. 23 (1): 53–69. pmid: 5503855.
13. 13. Карри Д.А., Милнер MJ, Эванс CW. Рост и дифференциация Invitro клеток воображаемого диска ног и крыльев от Drosophila-Melanogaster.Разработка. 1988. 102 (4): 805–14. WOS: A1988N132600014.
14. 14. Гибсон М.С., Патель А.Б., Нагпал Р., Перримон Н. Возникновение геометрического порядка в пролиферирующем эпителии многоклеточных животных. Природа. 2006. 442 (7106): 1038–41. Epub 2006/08/11. pmid: 16

    2.

15. 15. Кафферти П., Се Х, Браун К., Олд В.Дж. Живое изображение миграции глиальных клеток в имагинальном диске глаза дрозофилы. Журнал визуализированных экспериментов: JoVE. 2009; (29). Epub 2009/07/11. pmid: 195
    ; PubMed Central PMCID: PMC2762913.
16. 16. Алдаз С., Эскудеро Л.М., Фриман М. Живое изображение развития имагинального диска дрозофилы. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 2010. 107 (32): 14217–22. Epub 2010/07/28. pmid: 20660765; PubMed Central PMCID: PMC2922528.
17. 17. Осава С., Сугимура К., Такино К., Игаки Т. Конкуренция визуализирующих клеток в имагинальных дисках дрозофилы. Методы энзимологии. 2012; 506: 407–13. Epub 2012/02/22. pmid: 22341235.
18. 18.Зартман Дж., Рестрепо С., Баслер К. Высокопроизводительный шаблон для оптимизации органной культуры дрозофилы с помощью методов поверхности отклика (том 140, стр. 667, 2013). Разработка. 2013; 140 (13): 2848-. WOS: 000320168300024. pmid: 23293298
19. 19. Legoff L, Rouault H, Lecuit T. Глобальный образец механического стресса поляризует клеточные деления и форму клеток в растущем диске крыльев дрозофилы. Разработка. 2013. 140 (19): 4051–9. Epub 2013/09/21. pmid: 24046320.
20. 20. Handke B, Szabad J, Lidsky PV, Hafen E, Lehner CF.К долгосрочному выращиванию имагинальных дисков крыльев дрозофилы in vitro. Plos One. 2014; 9 (9): e107333. Epub 2014/09/10. pmid: 25203426; PubMed Central PMCID: PMC4159298.
21. 21. Шубигер М, Трумэн Дж. У. Ортолог RXR USP подавляет процессы раннего метаморфизма у Drosophila в отсутствие экдистероидов. Разработка. 2000; 127: 1151–9. pmid: 10683169
22. 22. Вольф Т, Готовый DF. В развитии Drosophila Melanogaster. Колд Спринг Харбор Пресс. 1993: 1277–316.
23. 23. Li C, Meinertzhagen IA. Условия первичной культуры имагинальных дисков глаз Drosophila melanogaster. Журнал нейробиологии. 1995. 28 (3): 363–80. pmid: 8568517.
24. 24. Картью RW. Формирование рисунка в глазу дрозофилы. Текущее мнение в области генетики и развития. 2007. 17 (4): 309–13. pmid: 17618111; PubMed Central PMCID: PMC2693403.
25. 25. Treisman JE. Дифференцировка сетчатки у дрозофилы. Междисциплинарные обзоры Wiley Биология развития.2013. 2 (4): 545–57. pmid: 24014422; PubMed Central PMCID: PMC3

    1.

26. 26. Майор Р.Дж., Ирвин К.Д. Локализация и потребность в миозине II на границе дорсально-вентрального компартмента крыла дрозофилы. Dev Dynam. 2006. 235 (11): 3051–8. WOS: 000241916000015. pmid: 17013876
27. 27. Мао И., Турнье А.Л., Бейтс П.А., Гейл Дж. Э., Тапон Н., Томпсон Б.Дж. Планарная поляризация атипичного миозина Dachs ориентирует клеточные деления у Drosophila. Гены и развитие. 2011. 25 (2): 131–6.pmid: 21245166; PubMed Central PMCID: PMC3022259.
28. 28. Баэна-Лопес Л.А., Баонза А., Гарсиа-Беллидо А. Ориентация клеточных делений определяет форму органов дрозофилы. Современная биология: CB. 2005. 15 (18): 1640–4. pmid: 16169485.
29. 29. Оброчта Д.А., Брайант П.Дж. Зона непролиферирующих клеток на границе рестрикции клонов у дрозофилы. Природа. 1985. 313 (5998): 138–41. WOS: A1985TZ25800047. pmid: 3917556
30. 30. Лян Л., Хауг Дж.С., Зайдель С.В., Гибсон МС.Функциональный геномный анализ периодического транскриптома в развивающемся крыле дрозофилы. Dev Cell. 2014. 29 (1): 112–27. WOS: 000334508800012. pmid: 24684830
31. 31. Zielke N, Korzelius J, van Straaten M, Bender K, Schuhknecht GFP, Dutta D, et al. Fly-FUCCI: универсальный инструмент для изучения пролиферации клеток в сложных тканях. Cell Rep. 2014; 7 (2): 588–98. WOS: 000335442300026. pmid: 24726363
32. 32. Fischer-Vize JA, Mosley KL. Мутанты Marbles: определение разобщающих клеток и миграция ядер в развивающемся глазу дрозофилы.Разработка. 1994. 120 (9): 2609–18. pmid: 7956836.
33. 33. Rangarajan R, Gong Q, Gaul U. Миграция и функция глии в развивающемся глазу дрозофилы. Разработка. 1999. 126 (15): 3285–92. Epub 1999/07/07. pmid: 10393108.
34. 34. Чой К.В., Бензер С. Миграция глии по аксонам фоторецепторов в развивающемся глазу дрозофилы. Нейрон. 1994. 12 (2): 423–31. pmid: 8110466.
35. 35. Силиес М., Юва Ю., Энгелен Д., Ахо А., Аист Т., Кламбт С. Миграция глиальных клеток в глазном диске.Журнал неврологии: официальный журнал Общества неврологии. 2007. 27 (48): 13130–9. Epub 2007/11/30. pmid: 18045907.
36. 36. Джей Д.Г. Селективное разрушение функции белков путем лазерной инактивации с помощью хромофора. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 1988. 85 (15): 5454–8. pmid: 3399501; PubMed Central PMCID: PMC281775.
37. 37. Royou A, Field C, Sisson JC, Sullivan W, Karess R. Переоценка роли и динамики немышечного миозина II во время формирования борозды у ранних эмбрионов дрозофилы.Молекулярная биология клетки. 2004. 15 (2): 838–50. pmid: 14657248; PubMed Central PMCID: PMC329397.
38. 38. Мартин А.С., Гелбарт М., Фернандес-Гонсалес Р., Кашубе М., Вишаус Э.Ф. Интеграция сократительных сил во время инвагинации тканей. Журнал клеточной биологии. 2010. 188 (5): 735–49. pmid: 20194639; PubMed Central PMCID: PMC2835944.
39. 39. Langevin J, Le Borgne R, Rosenfeld F, Gho M, Schweisguth F, Bellaiche Y. Смертельные гигантские личинки контролируют локализацию сигнальных регуляторов notch, онемение, неврализация и Sanpodo в клетках-предшественниках сенсорных органов дрозофилы.Современная биология: CB. 2005. 15 (10): 955–62. pmid: 15916953.
40. 40. Flici H, Cattenoz PB, Komonyi O, Laneve P, Erkosar B, Karatas OF, et al. Взаимосвязанные петли запускают спецификацию клонов и стабильные судьбы в нервной системе Drosophila. Nat Commun. 2014; 5. Artn 4484 WOS: 000340623400029.
41. 41. Calleja M, Moreno E, Pelaz S, Morata G. Визуализация экспрессии генов у живых взрослых дрозофил. Наука. 1996. 274 (5285): 252–5. WOS: A1996VM67100045. pmid: 8824191
42. 42.Crest J, Oxnard N, Ji JY, Schubiger G. Начало контрольной точки репликации ДНК в раннем эмбрионе дрозофилы. Генетика. 2007. 175 (2): 567–84. pmid: 17151243; PubMed Central PMCID: PMC1800604.
43. 43. Мизуно Х., Мал Т.К., Тонг К.И., Андо Р., Фурута Т., Икура М. и др. Фотоиндуцированное пептидное расщепление при превращении флуоресцентного белка из зеленого в красный. Молекулярная клетка. 2003. 12 (4): 1051–8. pmid: 14580354.
44. 44. Пай CY, Kuo TS, Jaw TJ, Kurant E, Chen CT, Bessarab DA, et al.Гомеопротеин Homothorax активирует ядерную локализацию другого гомеопротеина, Extradenticle, и подавляет развитие глаз у дрозофилы. Гены и развитие. 1998. 12 (3): 435–46. WOS: 000071942300013. pmid: 9450936
45. 45. Fan Y, Bergmann A. Антитело к расщепленной каспазе-3 является маркером активности DRONC, подобной каспазе-9, у дрозофилы. Гибель и дифференциация клеток. 2010. 17 (3): 534–9. pmid: 19960024; PubMed Central PMCID: PMC2822068.
46. 46. Милан М, Кампусано С, Гарсия-Беллидо А.Цикл клеточного цикла и узорчатая пролиферация клеток в крыле дрозофилы во время метаморфоза. Труды Национальной академии наук Соединенных Штатов Америки. 1996. 93 (21): 11687–92. pmid: 8876197; PubMed Central PMCID: PMC38119.
47. 47. Мартин AC, Kaschube M, Wieschaus EF. Импульсные сокращения актин-миозиновой сети вызывают апикальное сужение. Природа. 2009. 457 (7228): 495–9. Epub 2008/11/26. pmid: 1

    82; PubMed Central PMCID: PMC2822715.

Termex Web Analysis — Termex.com

1,67 Рейтинг CuteStat

Это домен с расширением com .Этот веб-сайт оценивается в 8,95 долларов США, а ежедневный доход составляет около 0,15 долларов США. Поскольку в последнее время пользователи не сообщали об активных угрозах, просматривать termex.com БЕЗОПАСНО.

Обновлено 4 года 3 месяца назад